การนับฟลูออเรสเซนต์คู่ของ AOPI เป็นประเภทการทดสอบที่ใช้สำหรับตรวจจับความเข้มข้นและความมีชีวิตของเซลล์สารละลายคือส่วนผสมของส้มอะคริดีน (คราบกรดนิวคลีอิกเรืองแสงสีเขียว) และโพรพิเดียมไอโอไดด์ (คราบกรดนิวคลีอิกเรืองแสงสีแดง)โพรพิเดียมไอโอไดด์ (PI) เป็นสีย้อมเพื่อการแยกเมมเบรนที่เข้าสู่เซลล์ที่มีเยื่อหุ้มเซลล์ที่ถูกบุกรุกเท่านั้น ในขณะที่ส้มอะคริดีนสามารถเจาะเซลล์ทั้งหมดในประชากรได้เมื่อสีย้อมทั้งสองมีอยู่ในนิวเคลียส โพรพิเดียมไอโอไดด์จะทำให้การเรืองแสงสีส้มของอะคริดีนลดลงโดยการถ่ายโอนพลังงานเรโซแนนซ์เรืองแสง (FRET)ผลที่ได้คือ เซลล์นิวคลีเอตที่มีเยื่อหุ้มที่ไม่เสียหายจะย้อมสีเขียวเรืองแสงและถูกนับเป็นชีวิต ในขณะที่เซลล์ที่เกิดนิวคลีเอตที่มีเยื่อหุ้มเซลล์ที่ถูกบุกรุกจะย้อมเป็นสีแดงเรืองแสงเท่านั้น และจะถูกนับว่าตายเมื่อใช้ระบบ Countstar® FLวัสดุที่ไม่ใช่นิวเคลียส เช่น เซลล์เม็ดเลือดแดง เกล็ดเลือด และเศษซากจะไม่เรืองแสงและจะถูกละเว้นโดยซอฟต์แวร์ Countstar® FL
กระบวนการบำบัดด้วยสเต็มเซลล์
รูปที่ 4 การตรวจสอบความมีชีวิตและจำนวนเซลล์ของเซลล์ต้นกำเนิดจากเยื่อหุ้มเซลล์ (MSC) สำหรับใช้ในการรักษาเซลล์
กำหนดความอยู่รอดของ MSC โดย AO/PI และการทดสอบ Trypan Blue
รูปที่ 2 A. รูปภาพของ MSC ที่ย้อมด้วย AO/PI และ Trypan Blue;2. การเปรียบเทียบผลลัพธ์ AO/PI และ Trypan blue ก่อนและหลังการขนส่ง
ดัชนีการหักเหของแสงของเซลล์เปลี่ยนไป การย้อมสี Trypan Blue ไม่ชัดเจนนัก เป็นการยากที่จะระบุความมีชีวิตหลังการขนส่งในขณะที่สารเรืองแสงสองสีช่วยให้สามารถย้อมเซลล์นิวคลีเอตที่มีชีวิตและเซลล์ที่ตายแล้ว ทำให้เกิดผลการมีชีวิตที่แม่นยำแม้ในการปรากฏตัวของเศษ เกล็ดเลือด และเซลล์เม็ดเลือดแดง
