Immunofenotyyppianalyysi on tyypillinen koe, joka suoritetaan soluihin liittyvillä tutkimusaloilla erilaisten sairauksien (autoimmuunisairaus, immuunipuutossairaus, kasvaindiagnoosi, hemostaasi, allergiset sairaudet ja monet muut) ja sairauden patologioiden diagnosoimiseksi.Sitä käytetään myös solujen laadun testaamiseen erilaisissa solusairauksien tutkimuksissa.Virtaussytometria ja fluoresenssimikroskooppi ovat rutiinianalyysimenetelmiä solusairauksien tutkimuslaitoksissa, joita käytetään immunofenotyyppien määritykseen.Mutta nämä analyysimenetelmät voivat tuottaa vain kuvia tai datasarjoja, jotka eivät välttämättä täytä sääntelyviranomaisten tiukkoja hyväksymisvaatimuksia.
M Dominici el, Cytotherapy (2006) Voi.8, nro 4, 315-317
AdMSC:iden immunofenotyypin tunnistaminen
AdMSC:iden immunofenotyyppi määritettiin Countstar FL:llä, AdMSC:itä inkuboitiin vastaavasti eri vasta-aineiden kanssa (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105 ja HLADR).Signaalivärin sovellusmenettely luotiin asettamalla vihreä kanava kuvan PE-fluoresenssiin sekä kirkkaaseen kenttään.Kirkkaan kentän kuvan vertailusegmentointia käytettiin maskina PE-fluoresenssisignaalin näytteenottoon.CD105:n tulokset esitettiin (kuvio 1).
Kuvio 1 AdMSC:iden immunofenotyypin tunnistus.A. AdMSC:iden kirkas kenttä- ja fluoresenssikuva;B. Countstar FL:n suorittama AdMSC:iden CD-merkkien tunnistus
MSC:iden laadunvalvonta – tulosten validointi jokaiselle yksittäiselle solulle
Kuva 2 A: Countstar FL -tulokset näytettiin FCS express 5plusissa, portittaen CD105:n positiivisen prosenttiosuuden ja yleiskatsauksen taulukon yksittäisissä soluissa.B: Oikealle puolelle säädetty portti, yksisolutaulukon kuvat näyttävät solut, joissa on korkea CD105:n ekspressio.C: Säädetty portti vasemmalle, yksittäisten solujen kuvat -taulukossa näkyvät solut, joissa CD105:n ekspressio on alhainen.
Fenotyyppiset muutokset kuljetuksen aikana
Kuva 3. A: CD105:n positiivisen prosenttiosuuden kvantitatiivinen analyysi eri näytteissä FCS express 5 plus -ohjelmistolla.B: Korkealaatuiset kuvat tarjoavat morfologista lisätietoa.C: Validoidut tulokset kunkin yksittäisen solun miniatyyreillä, FCS-ohjelmistotyökalut jakoivat solut erilaisiin
