Зразок, що містить клітини в суспензії, змішують з трипановим синім барвником, потім втягують у слайд камери Countstar, аналізований за допомогою автоматизованого лічильника клітин Countstar.На основі класичного принципу підрахунку клітин трипанового синього, інструменти Countstar інтегрують передову технологію оптичного зображення, інтелектуальну технологію розпізнавання зображень і потужні програмні алгоритми, щоб не тільки забезпечити концентрацію клітин і їх життєздатність, але й надати інформацію про концентрацію клітин, життєздатність, швидкість агрегації, округлість. , і розподіл діаметра лише за один пробіг.
Агрегований клітинний аналіз
Рисунок 3 Підрахунок агрегованих клітин.
A. Зображення зразка клітини;
B. Зображення зразка клітини з ідентифікаційним знаком програмного забезпечення Countstar BioTech.(Зелене коло: жива клітина, жовте коло: мертва клітина, червоне коло: агрегована клітина).
C. Зведена гістограма
Деякі первинні клітини або клітини субкультури схильні до агрегації при поганому стані культури або надмірному перетравленні, що спричиняє великі труднощі при підрахунку клітин.За допомогою функції калібрування агрегації Countstar може реалізувати стимуляційний розрахунок агрегацій, щоб забезпечити точний підрахунок клітин і отримати швидкість агрегації та гістограму агрегації, забезпечуючи таким чином основу для експериментаторів для оцінки стану клітин.
Моніторинг росту клітин
Малюнок 4 Крива росту клітин.
Крива росту клітин є поширеним методом для вимірювання абсолютного зростання кількості клітин, важливим показником для визначення концентрації клітин і одним з основних параметрів для культури основних біологічних властивостей клітин.Щоб точно описати динамічну зміну кількості клітин протягом усього процесу, типову криву росту можна розділити на 4 частини: інкубаційний період з повільним зростанням;фаза експоненціального зростання з великим нахилом, фаза плато і період спаду.Криву росту клітин можна отримати шляхом побудови графіка між кількістю живих клітин (10 000/мл) і часом культивування (h або d).
Вимірювання концентрації та життєздатності клітин
Малюнок 1 Зображення були отримані Countstar BioTech, оскільки клітини (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9 і MDCK) у суспензії фарбували трипановим синім відповідно.
Countstar застосовний до клітин діаметром 5-180 мкм, таких як клітина ссавців, клітина комах і деякі планктони.
Вимірювання розміру клітини
Рисунок 2. Вимірювання розміру клітин СНО-клітин до та після трансфекції плазміди.
A. Зображення суспензії клітин CHO, забарвленої трипановим синім до і після трансфекції плазміди.
B. Порівняння гістограми розмірів клітин CHO до та після трансфекції плазміди.
Зміна розміру клітини є ключовою ознакою і зазвичай вимірюється під час дослідження клітин.Зазвичай він вимірюється в таких експериментах: трансфекція клітин, тест на наркотики та аналізи активації клітин.Countstar надає статистичні дані морфології, такі як розміри клітин, протягом 20 секунд.
Автоматизований лічильник клітин Countstar може надавати морфологічні дані клітин, включаючи гістограми циркулярності та діаметра.
