Një kampion që përmban qeliza në suspension po përzihet me ngjyrën blu të Trypanit, më pas tërhiqet në rrëshqitjen e dhomës Countstar të analizuar nga Countstar Automated Cell Counter.Bazuar në parimin klasik të numërimit të qelizave blu "trypan", instrumentet e Countstar integrojnë teknologjinë e avancuar të imazhit optik, teknologjinë inteligjente të njohjes së imazhit dhe algoritme të fuqishme softuerike për të siguruar jo vetëm përqendrimin dhe qëndrueshmërinë e qelizave, por gjithashtu ofrojnë informacionin e përqendrimit, qëndrueshmërisë, shkallës së grumbullimit, rrumbullakësisë. , dhe shpërndarja e diametrit me vetëm një drejtim.
Analiza e grumbulluar e qelizave
Figura 3 Numërimi i qelizave të grumbulluara.
A. Imazhi i mostrës së qelizës;
B. Imazhi i mostrës së qelizës me shenjë identifikimi nga softueri Countstar BioTech.(Rrethi jeshil: Qelizë e gjallë, Rrethi i verdhë: Qelizë e vdekur, Rrethi i kuq: Qelizë e grumbulluar).
C. Histograma e grumbulluar
Disa qeliza primare ose qeliza nënkulturore janë të prirura për t'u grumbulluar kur gjendja e dobët e kulturës ose tretja e tepërt, duke shkaktuar kështu vështirësi të mëdha në numërimin e qelizave.Me funksionin e kalibrimit të grumbullimit, Countstar mund të realizojë një llogaritje stimulimi të grumbullimeve për të siguruar numërimin e saktë të qelizave dhe për të marrë shkallën e grumbullimit dhe histogramin e grumbullimit, duke siguruar kështu bazën për eksperimentuesit për të gjykuar gjendjen e qelizave.
Monitorimi i rritjes së qelizave
Figura 4 Kurba e rritjes së qelizave.
Kurba e rritjes së qelizave është një metodë e zakonshme për matjen e rritjes absolute të numrit të qelizave, një tregues i rëndësishëm për të përcaktuar përqendrimin e qelizave dhe një nga parametrat bazë për kulturën e vetive biologjike bazë të qelizave.Për të përshkruar me saktësi ndryshimin dinamik në numrin e qelizave gjatë gjithë procesit, kurba tipike e rritjes mund të ndahet në 4 pjesë: periudha e inkubacionit me rritje të ngadaltë;Faza e rritjes eksponenciale me pjerrësi të madhe, fazë pllaja dhe periudha e rënies.Kurba e rritjes së qelizave mund të merret duke vizatuar numrin e qelizave të gjalla (10'000/mL) kundrejt kohës së kultivimit (h ose d).
Matja e përqendrimit dhe qëndrueshmërisë së qelizave
Figura 1 Imazhet u kapën nga Countstar BioTech ndërsa qelizat (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9 dhe MDCK) në pezullim u ngjyrosën përkatësisht nga Trypan Blue.
Countstar është i zbatueshëm për qelizat me diametër midis 5-180um, si qeliza e gjitarëve, qeliza e insekteve dhe disa planktone.
Matja e madhësisë së qelizave
Figura 2 Matja e madhësisë së qelizave të qelizave CHO para dhe pas transfeksionit plazmid.
A. Imazhet e suspensionit të qelizave CHO të ngjyrosura nga bluja e tripanit para dhe pas transfektimit plazmid.
B. Krahasimi i histogramit të madhësisë së qelizave CHO para dhe pas transfeksionit plazmid.
Ndryshimi i madhësisë së qelizave është një veçori kryesore dhe matet zakonisht në kërkimin e qelizave.Normalisht do të matet në këto eksperimente: transfeksioni qelizor, testi i barnave dhe analizat e aktivizimit të qelizave.Countstar ofron të dhëna morfologjike statistikore, të tilla si madhësitë e qelizave, brenda 20 sekondave.
Numëruesi i automatizuar i qelizave Countstar mund të japë të dhënat morfologjike të qelizave, duke përfshirë rrethoren dhe histogramet e diametrit.
