Suspenziyadagi hujayralarni o'z ichiga olgan namuna Tripan ko'k bo'yog'i bilan aralashtiriladi, so'ngra Countstar avtomatlashtirilgan hujayra hisoblagichi tomonidan tahlil qilingan Countstar kamera slaydga tortiladi.Klassik tripan ko'k hujayralarni hisoblash printsipiga asoslanib, Countstar'ning asboblari ilg'or optik tasvirlash texnologiyasini, tasvirni aqlli aniqlash texnologiyasini va kuchli dasturiy ta'minot algoritmlarini nafaqat hujayra kontsentratsiyasi va hayotiyligini ta'minlabgina qolmay, balki hujayra kontsentratsiyasi, hayotiyligi, yig'ilish tezligi, yumaloqligi haqida ma'lumot beradi. , va diametrini faqat bitta yugurish bilan taqsimlash.
Agregatlangan hujayra tahlili
3-rasm Birlashtirilgan hujayralarni hisoblash.
A. Hujayra namunasi tasviri;
B. Countstar BioTech dasturi tomonidan identifikatsiya belgisi bilan hujayra namunasi tasviri.(Yashil doira: jonli hujayra, sariq doira: o'lik hujayra, qizil doira: yig'ilgan hujayra).
C. Agregatlangan gistogramma
Ba'zi birlamchi hujayralar yoki subkultura hujayralari yomon madaniyat holatida yoki haddan tashqari hazm bo'lganda yig'ilishga moyil bo'lib, hujayralarni hisoblashda katta qiyinchiliklarga olib keladi.Aggregatsiya kalibrlash funksiyasi yordamida Countstar hujayralarni aniq hisoblashni ta'minlash va agregatsiya tezligi va agregatsiya gistogrammasini olish uchun agregatsiyalarning stimulyatsion hisobini amalga oshirishi mumkin, bu esa eksperimentchilarga hujayralar holatini baholash uchun asos yaratadi.
Hujayra o'sishi monitoringi
4-rasm Hujayra o'sishi egri chizig'i.
Hujayra o'sish egri chizig'i hujayralar sonining mutlaq o'sishini o'lchashning keng tarqalgan usuli, hujayra kontsentratsiyasini aniqlashning muhim ko'rsatkichi va hujayralarning asosiy biologik xususiyatlarini madaniyatining asosiy parametrlaridan biridir.Butun jarayon davomida hujayralar sonining dinamik o'zgarishini to'g'ri tasvirlash uchun odatiy o'sish egri chizig'ini 4 qismga bo'lish mumkin: sekin o'sish bilan inkubatsiya davri;katta qiyalik, plato fazasi va pasayish davri bilan eksponensial o'sish bosqichi.Hujayra o'sishi egri chizig'ini tirik hujayralar sonini (10'000/ml) ekish vaqtiga (h yoki d) solishtirish orqali olish mumkin.
Hujayra konsentratsiyasi va hayotiyligini o'lchash
1-rasm Tasvirlar Countstar BioTech tomonidan olingan, suspenziyadagi hujayralar (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9 va MDCK) mos ravishda Trypan Blue bilan bo'yalgan.
Countstar sutemizuvchilar hujayrasi, hasharotlar xujayrasi va ba'zi planktonlar kabi diametri 5-180 um gacha bo'lgan hujayralar uchun qo'llaniladi.
Hujayra hajmini o'lchash
Shakl 2 Plazmid transfeksiyasidan oldin va keyin CHO hujayralarining hujayra hajmini o'lchash.
A. Plazmid transfeksiyasidan oldin va keyin tripan ko'k bilan bo'yalgan CHO hujayralari suspenziyasining tasvirlari.
B. Plazmid transfeksiyasidan oldin va keyin CHO hujayra kattaligi gistogrammasini solishtirish.
Hujayra hajmining o'zgarishi asosiy xususiyatdir va odatda hujayra tadqiqotlarida o'lchanadi.Odatda bu tajribalarda o'lchanadi: hujayra transfeksiyasi, dori sinovi va hujayra faollashuvi tahlillari.Countstar 20 soniya ichida hujayralar o'lchamlari kabi statistik morfologik ma'lumotlarni taqdim etadi.
Countstar avtomatlashtirilgan hujayra hisoblagichi hujayralarning morfologik ma'lumotlarini, shu jumladan aylana va diametrli gistogrammalarni berishi mumkin.
