Ett prov som innehåller celler i suspension blandas med trypanblått färgämne och dras sedan in i Countstar Chamber Slide analyserat av Countstar Automated Cell Counter.Baserat på den klassiska trypanblå cellräkningsprincipen, integrerar Countstars instrument avancerad optisk bildteknik, intelligent bildigenkänningsteknik och kraftfulla mjukvarualgoritmer för att inte bara tillhandahålla cellkoncentration och livsduglighet, utan också tillhandahålla information om cellkoncentration, viabilitet, aggregeringshastighet, rundhet , och diameterfördelning med endast en körning.
Aggregerad cellanalys
Figur 3. Räkning av aggregerade celler.
A. Bild av cellprov;
B. Bild av cellprov med identifieringsmärke av programvaran Countstar BioTech.(Grön cirkel: levande cell, gul cirkel: död cell, röd cirkel: aggregerad cell).
C. Aggregerat histogram
Vissa primära celler eller subkulturceller är benägna att aggregera vid dålig odling eller överdriven matsmältning, vilket orsakar stora svårigheter vid räkning av celler.Med funktionen Aggregation Calibration kan Countstar realisera en stimuleringsberäkning av aggregationer för att säkerställa korrekt cellräkning och erhålla aggregationshastigheten och aggregationshistogrammet, vilket ger en grund för experimenterande att bedöma cellers tillstånd.
Övervakning av celltillväxt
Figur 4 Celltillväxtkurva.
Celltillväxtkurva är en vanlig metod för att mäta den absoluta tillväxten av cellantal, en viktig indikator för att bestämma cellkoncentration och en av de grundläggande parametrarna för odling av cellers grundläggande biologiska egenskaper.För att korrekt beskriva den dynamiska förändringen av antalet celler under hela processen, kan den typiska tillväxtkurvan delas in i 4 delar: inkubationsperiod med långsam tillväxt;exponentiell tillväxtfas med stor lutning, platåfas och nedgångsperiod.Celltillväxtkurvan kan erhållas genom att plotta antalet levande celler (10 000/ml) mot odlingstiden (h eller d).
Mätning av cellkoncentration och livsduglighet
Figur 1 Bilder togs av Countstar BioTech när celler (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9 och MDCK) i suspension färgades med Trypan Blue respektive.
Countstar är tillämplig på celler med diameter mellan 5-180um, som däggdjursceller, insektsceller och vissa planktoner.
Cellstorleksmätning
Figur 2 Cellstorleksmätning av CHO-celler före och efter plasmidtransfektionen.
A. Bilder av CHO-cellsuspension färgade med trypanblått före och efter plasmidtransfektionen.
B. Jämförelse av CHO-cellstorlekshistogram före och efter plasmidtransfektionen.
Förändringen av cellstorlek är en nyckelfunktion och mäts vanligtvis inom cellforskning.Normalt kommer det att mätas i dessa experiment: celltransfektion, drogtest och cellaktiveringsanalyser.Countstar tillhandahåller statistisk morfologidata, såsom cellstorlekar, inom 20s.
Countstar automatiserad cellräknare kan ge morfologiska data för celler, inklusive cirkularitets- och diameterhistogram.
