Countstar Mira FL

Особливості продукту

Інноваційна технологія оптичного множення

Унікальна технологія масштабування дозволяє користувачам аналізувати клітини в широкому діапазоні діаметрів

Використовуючи шаблони BioApp із яскравим полем у Countstar Mira, нова технологія масштабування дозволяє оператору точно ідентифікувати клітинні об’єкти в діапазоні діаметрів від 1,0 мкм до 180,0 мкм.Отримані зображення показують навіть деталі окремих клітин.Це розширює діапазон застосування навіть до клітинних об’єктів, які раніше не можна було точно проаналізувати.

Алгоритми аналізу зображень на основі прогресивного штучного інтелекту

Countstar Mira FL використовує переваги штучного інтелекту для розробки алгоритмів самонавчання.Вони здатні ідентифікувати та аналізувати численні характеристики клітин.Інтеграція параметрів форми клітини дозволяє проводити високоточний і відтворюваний аналіз стану клітинного циклу та/або надає дані про кореляцію між зміною морфології клітин, утворенням кластерів клітин (агрегати, сфероїди невеликого розміру) та умовами впливу.

Результати маркування мезенхімальних стовбурових клітин неправильної форми (MSC; 5-кратне збільшення) у культурі, що проліферує

• Зелені кружечки позначають живі клітини
• Червоні кола позначають мертві клітини
• Білі кола агрегованих клітин

Клітинна лінія RAW264.7 маленька і легко злипається.Алгоритм Countstar AI може ідентифікувати клітини в згустках і підрахувати

• Зелені кружечки позначають живі клітини
• Червоні кола позначають мертві клітини
• Білі кола агрегованих клітин

Нерівномірний розмір ембріональних клітин рибки данио (збільшення 6,6X

• Зелені кружечки позначають живі клітини
• Червоні кола позначають мертві клітини
• Білі кола агрегованих клітин

Інтуїтивно зрозумілий графічний інтерфейс користувача (GUI).

Чіткий структурований графічний інтерфейс дозволяє ефективно та комфортно проводити експеримент

• Велика бібліотека з попередньо встановленими типами клітин і BioApps (протоколи шаблонів аналізу).Лише один клік на BioApp, і тест можна розпочати.
• Зручний графічний інтерфейс дозволяє легко перемикатися між різними параметрами меню та гарантує комфортне тестування
• Чіткі структуровані модулі меню підтримують користувача в щоденній рутині тестування

Виберіть BioApp, введіть ідентифікатор зразка та почніть запуск аналізу

128 ГБ внутрішнього сховища даних, достатньо для зберігання прибл.50 000 результатів аналізу в Countstar (R) Mira.Для швидкого доступу потрібні дані можна вибрати різними параметрами пошуку.

Корисною функцією для економії часу є доступний калькулятор розведення.Він надасть точні об’єми розчинника та вихідного зразка клітин після введення кінцевої концентрації клітин і цільового об’єму.Це робить перехід клітин до їх субкультур комфортним.

Багато функцій програми

Функції аналізу Countstar Mira допомагають користувачеві зрозуміти динамічні зміни в культурі клітин і допомагають оптимізувати умови їх зростання.

Удосконалене програмне забезпечення для розпізнавання зображень на основі штучного інтелекту Countstar Mira здатне надавати безліч параметрів.Крім стандартних результатів концентрації клітин і стану життєздатності, важливими параметрами для оцінки фактичного стану є розподіл клітин за розміром, можливе утворення клітинних кластерів, відносна інтенсивність флуоресценції кожної окремої клітини, форма кривої росту та їх зовнішній морфологічний фактор. стан культури клітин.Автоматично згенеровані графіки кривих росту, гістограми розподілу діаметрів та інтенсивності флуоресценції, аналіз окремих клітин всередині агрегатів і визначення параметра компактності клітин полегшують користувачеві краще зрозуміти динамічні процеси всередині досліджуваної культури клітин від початку до завершення процесу.

Гістограма

Гістограма розподілу відносної інтенсивності флуоресценції (RFI).

Гістограма розподілу по діаметру

Крива зростання

Тестові зображення та результати

Діаграма кривої зростання

Застосування продукту

Аналіз щільності та життєздатності клітин подвійної флуоресценції AO/PI

Метод подвійної флуоресценції забарвлення AO/PI заснований на тому принципі, що обидва барвники, акридиновий помаранчевий (AO) і пропідій йодид (PI), інтеркалують між нуклеїновими кислотами хромосоми в ядрі клітини.У той час як АО здатна в будь-який момент проникнути через інтактні мембрани ядра і забарвити ДНК, PI може пройти лише через порушену мембрану ядра вмираючої (мертвої) клітини.Накопичена АО в ядрі клітини випромінює зелене світло на довжині максимуму 525 нм, якщо збуджується на 480 нм, PI посилає червоне світло з амплітудою 615 нм, коли збуджується на 525 нм.Ефект FRET (Foerster Resonance Energy Transfer) гарантує, що випромінюваний сигнал AO на 525 нм поглинається в присутності барвника PI, щоб уникнути подвійного випромінювання світла та його переливання.Ця спеціальна комбінація барвників AO/PI дозволяє специфічно фільтрувати клітини, що містять ядро, у присутності акаріотів, таких як еритроцити.

Дані Countstar Mira FL показали хорошу лінійність для градієнтного розведення клітин HEK293

Аналіз ефективності трансфекції GFP/RFP

Ефективність трансфекції є важливим показником у розвитку та оптимізації клітинної лінії, у налаштуванні вірусного вектора та для моніторингу виходу продукту в процесах Biopharma.Це став найбільш поширеним тестом для швидкого і надійного визначення вмісту цільового білка всередині клітини.У різних підходах до генної терапії він є незамінним інструментом для контролю ефективності трансфекції бажаної генетичної модифікації.

Countstar Mira не тільки надає точні та точні результати порівняно з проточною цитометрією, а також аналізатор надає зображення як доказ доказу.Крім того, це значно спрощує та пришвидшує аналіз, щоб упорядкувати розвиток процесу розробки та виробництва.

Серія зображень, отримана Countstar(R) Mira, демонструє підвищення рівня ефективності трансфекції (зліва направо) генетично модифікованих клітин (лінія клітин HEK 293; експресія GFP в різних концентраціях)

Результати порівняльних вимірювань, виконаних за допомогою B/C CytoFLEX, що підтверджують дані ефективності трансфекції GFP модифікованих клітин HEK 293, проаналізованих у Countstar Mira

Широко поширений аналіз життєздатності трипанового синього

Аналіз дискримінації життєздатності трипанового синього все ще є одним із найбільш широко використовуваних і надійних методів визначення кількості (вмираючих) мертвих клітин у суспензійній клітинній культурі.Життєздатні клітини з неушкодженою структурою зовнішньої клітинної мембрани відштовхують трипановий синій від проникнення через мембрану.У випадку, якщо клітинна мембрана протікає через прогресування її клітинної загибелі, трипановий синій може пройти мембранний бар’єр, накопичується в клітинній плазмі і забарвлює клітину в синій колір.Цю оптичну різницю можна використовувати, щоб відрізнити бездоганно живі клітини від мертвих за допомогою алгоритмів розпізнавання зображень Countstar Mira FL.

• Зображення трьох клітинних ліній, забарвлених трипановим синім, отримані в Countstar (R) Mira FL в режимі яскравого поля.

• Результати градієнта розведення серії HEK 293