غلظت سلولی، زنده ماندن، و اندازه سلول و اندازه گیری تجمع

نمونه‌ای حاوی سلول‌های سوسپانسیون با رنگ آبی تریپان مخلوط می‌شود، سپس به داخل اسلاید محفظه Countstar کشیده می‌شود که توسط شمارنده سلولی خودکار Countstar آنالیز شده است.بر اساس اصل شمارش سلول‌های آبی تریپان کلاسیک، ابزارهای Countstar فناوری تصویربرداری نوری پیشرفته، فناوری تشخیص تصویر هوشمند و الگوریتم‌های نرم‌افزاری قدرتمند را ادغام می‌کنند تا نه تنها غلظت و زنده بودن سلول را فراهم کنند، بلکه اطلاعات مربوط به غلظت، زنده بودن، سرعت تجمع، گرد بودن سلول را نیز فراهم می‌کنند. ، و توزیع قطر تنها با یک اجرا.

تجزیه و تحلیل سلولی تجمعی

شکل 3 شمارش سلول های تجمع یافته.

الف. تصویر نمونه سلول.
ب. تصویر نمونه سلول با علامت شناسایی توسط نرم افزار Countstar BioTech.(دایره سبز: سلول زنده، دایره زرد: سلول مرده، دایره قرمز: سلول تجمعی).
ج. هیستوگرام تجمعی

برخی از سلول‌های اولیه یا سلول‌های خرده‌کشتی در هنگام کشت ضعیف یا هضم بیش از حد مستعد تجمع هستند، بنابراین شمارش سلول‌ها را با مشکل مواجه می‌کند.با تابع کالیبراسیون تجمع، Countstar می‌تواند محاسبات تحریکی تجمعات را برای اطمینان از شمارش سلولی دقیق و به دست آوردن نرخ تجمع و هیستوگرام تجمع انجام دهد، بنابراین مبنایی برای آزمایش‌کنندگان برای قضاوت در مورد وضعیت سلول‌ها فراهم می‌کند.

نظارت بر رشد سلولی

شکل 4 منحنی رشد سلولی.

منحنی رشد سلولی روشی رایج برای اندازه‌گیری رشد مطلق تعداد سلول، شاخصی مهم برای تعیین غلظت سلولی و یکی از پارامترهای اساسی برای کشت خواص بیولوژیکی پایه سلول‌ها است.به منظور توصیف دقیق تغییر دینامیکی تعداد سلول ها در کل فرآیند، منحنی رشد معمولی را می توان به 4 بخش تقسیم کرد: دوره جوجه کشی با رشد آهسته.فاز رشد نمایی با شیب زیاد، فاز فلات و دوره نزول.منحنی رشد سلولی را می توان با ترسیم تعداد سلول های زنده (10000/mL) در برابر زمان کشت (h یا d) بدست آورد.

اندازه گیری غلظت و زنده ماندن سلولی

شکل 1 تصاویر توسط Countstar BioTech گرفته شد زیرا سلول‌های (Vero، 3T3، 549، B16، CHO، Hela، SF9، و MDCK) در سوسپانسیون توسط Trypan Blue رنگ‌آمیزی شدند.

Countstar برای سلول هایی با قطر بین 5-180 میلی متر مانند سلول پستانداران، سلول حشرات و برخی پلانکتون ها قابل استفاده است.

اندازه گیری اندازه سلول

شکل 2 اندازه گیری اندازه سلول سلول های CHO قبل و بعد از ترانسفکشن پلاسمید.

الف. تصاویر سوسپانسیون سلول های CHO رنگ آمیزی شده با تریپان بلو قبل و بعد از ترانسفکشن پلاسمید.
ب. مقایسه هیستوگرام اندازه سلول CHO قبل و بعد از ترانسفکشن پلاسمید.

تغییر اندازه سلول یک ویژگی کلیدی است و معمولاً در تحقیقات سلولی اندازه گیری می شود.معمولاً در این آزمایش‌ها اندازه‌گیری می‌شود: ترانسفکشن سلولی، آزمایش دارو و سنجش فعال‌سازی سلول.Countstar داده های مورفولوژی آماری، مانند اندازه سلول ها را در عرض 20 ثانیه ارائه می دهد.

شمارنده سلول خودکار Countstar می‌تواند داده‌های مورفولوژیکی سلول‌ها، از جمله هیستوگرام دایره‌ای و قطر را ارائه دهد.