निलंबन में कोशिकाओं वाला एक नमूना ट्रिपैन ब्लू डाई के साथ मिला रहा है, फिर काउंटस्टार ऑटोमेटेड सेल काउंटर द्वारा विश्लेषण किए गए काउंटस्टार चैंबर स्लाइड में खींचा गया है।क्लासिक ट्रिपैन ब्लू सेल काउंटिंग सिद्धांत के आधार पर, काउंटस्टार के उपकरण उन्नत ऑप्टिकल इमेजिंग तकनीक, बुद्धिमान छवि पहचान प्रौद्योगिकी और शक्तिशाली सॉफ्टवेयर एल्गोरिदम को एकीकृत करते हैं, जो न केवल सेल एकाग्रता और व्यवहार्यता प्रदान करते हैं, बल्कि सेल एकाग्रता, व्यवहार्यता, एकत्रीकरण दर, गोलाई की जानकारी भी प्रदान करते हैं। , और व्यास वितरण केवल एक रन के साथ।
एकत्रित सेल विश्लेषण
चित्र 3 एकत्रित कक्षों की गणना।
ए सेल नमूने की छवि;
ख. काउंटस्टार बायोटेक सॉफ्टवेयर द्वारा पहचान चिह्न के साथ सेल नमूने की छवि।(ग्रीन सर्कल: लाइव सेल, येलो सर्कल: डेड सेल, रेड सर्कल: एग्रीगेटेड सेल)।
C. एग्रीगेटेड हिस्टोग्राम
कुछ प्राथमिक कोशिकाएं या उपसंस्कृति कोशिकाएं खराब संस्कृति की स्थिति या अत्यधिक पाचन होने पर एकत्रित होने की संभावना होती हैं, इस प्रकार कोशिकाओं की गिनती में बड़ी कठिनाई होती है।एकत्रीकरण अंशांकन समारोह के साथ, काउंटस्टार सटीक सेल गिनती सुनिश्चित करने और एकत्रीकरण दर और एकत्रीकरण हिस्टोग्राम प्राप्त करने के लिए एकत्रीकरण की एक उत्तेजना गणना का एहसास कर सकता है, इस प्रकार प्रयोगकर्ताओं को कोशिकाओं की स्थिति का न्याय करने के लिए आधार प्रदान करता है।
सेल ग्रोइंग की निगरानी
चित्रा 4 सेल ग्रो कर्व।
सेल ग्रोथ कर्व सेल नंबर की पूर्ण वृद्धि को मापने के लिए एक सामान्य तरीका है, सेल एकाग्रता निर्धारित करने के लिए एक महत्वपूर्ण संकेतक और कोशिकाओं के बुनियादी जैविक गुणों की संस्कृति के लिए बुनियादी मानकों में से एक है।पूरी प्रक्रिया के दौरान कोशिकाओं की संख्या में गतिशील परिवर्तन का सटीक वर्णन करने के लिए, विशिष्ट विकास वक्र को 4 भागों में विभाजित किया जा सकता है: धीमी वृद्धि के साथ ऊष्मायन अवधि;बड़े ढलान, पठारी चरण और गिरावट की अवधि के साथ घातीय वृद्धि चरण।सेल ग्रोथ कर्व को कल्चर टाइम (एच या डी) के खिलाफ जीवित कोशिकाओं (10'000/एमएल) की संख्या की साजिश रचकर प्राप्त किया जा सकता है।
सेल एकाग्रता और व्यवहार्यता मापना
चित्रा 1 छवियों को काउंटस्टार बायोटेक द्वारा कोशिकाओं (वेरो, 3T3, 549, B16, CHO, हेला, SF9, और MDCK) के रूप में निलंबन में क्रमशः ट्रिपैन ब्लू द्वारा दाग दिया गया था।
काउंटस्टार 5-180um के बीच व्यास वाली कोशिकाओं पर लागू होता है, जैसे स्तनधारी कोशिका, कीट कोशिका और कुछ प्लवक।
सेल आकार मापन
चित्रा 2 प्लाज्मिड अभिकर्मक से पहले और बाद में सीएचओ कोशिकाओं का सेल आकार मापन।
A. प्लास्मिड ट्रांसफेक्शन से पहले और बाद में ट्रिपैन ब्लू द्वारा दागे गए सीएचओ कोशिकाओं के निलंबन की छवियां।
बी प्लाज्मिड ट्रांसफेक्शन से पहले और बाद में सीएचओ सेल आकार हिस्टोग्राम की तुलना।
सेल आकार में परिवर्तन एक प्रमुख विशेषता है और आमतौर पर सेल अनुसंधान में मापा जाता है।आम तौर पर इसे इन प्रयोगों में मापा जाएगा: सेल ट्रांसफेक्शन, ड्रग टेस्ट और सेल एक्टिवेशन एसेज़।काउंटस्टार 20 के भीतर सांख्यिकीय आकारिकी डेटा प्रदान करता है, जैसे कि कोशिकाओं का आकार।
काउंटस्टार स्वचालित सेल काउंटर सर्कुलरिटी और व्यास हिस्टोग्राम सहित कोशिकाओं के रूपात्मक डेटा दे सकता है।
