Mėginys, kuriame yra suspensijoje esančių ląstelių, maišomas su tripano mėlynu dažikliu, tada traukiamas į Countstar Chamber Slide, analizuotą Countstar Automated Cell Counter.Remiantis klasikiniu tripano mėlynųjų ląstelių skaičiavimo principu, „Countstar“ prietaisai integruoja pažangią optinio vaizdo gavimo technologiją, intelektualią vaizdo atpažinimo technologiją ir galingus programinės įrangos algoritmus, kurie ne tik užtikrina ląstelių koncentraciją ir gyvybingumą, bet ir informaciją apie ląstelių koncentraciją, gyvybingumą, agregacijos greitį, apvalumą. , ir skersmens pasiskirstymas tik vienu paleidimu.
Suvestinė ląstelių analizė
3 pav. Sukauptų ląstelių skaičiavimas.
A. Ląstelės pavyzdžio vaizdas;
B. Ląstelės mėginio vaizdas su identifikavimo ženklu, sukurtas Countstar BioTech programinės įrangos.(Žalias apskritimas: gyva ląstelė, geltonas apskritimas: negyva ląstelė, raudonas apskritimas: agreguota ląstelė).
C. Suvestinė histograma
Kai kurios pirminės ląstelės arba subkultūros ląstelės yra linkusios agreguotis, kai bloga kultūrinė būklė arba per didelis virškinimas, todėl kyla didelių sunkumų skaičiuojant ląsteles.Naudodamas agregacijos kalibravimo funkciją, „Countstar“ gali atlikti agregacijų stimuliavimo skaičiavimą, kad užtikrintų tikslų ląstelių skaičiavimą ir gautų agregacijos greitį bei agregacijos histogramą, taip suteikdamas pagrindą eksperimentuotojams spręsti apie ląstelių būklę.
Ląstelių augimo stebėjimas
4 pav. Ląstelių augimo kreivė.
Ląstelių augimo kreivė yra įprastas absoliutaus ląstelių skaičiaus augimo matavimo metodas, svarbus ląstelių koncentracijos nustatymo rodiklis ir vienas iš pagrindinių pagrindinių biologinių ląstelių savybių kultūros parametrų.Siekiant tiksliai apibūdinti dinaminį ląstelių skaičiaus kitimą viso proceso metu, tipinę augimo kreivę galima suskirstyti į 4 dalis: inkubacinis laikotarpis su lėtu augimu;Eksponentinio augimo fazė su dideliu nuolydžiu, plokščiakalnio fazė ir nuosmukio periodas.Ląstelių augimo kreivę galima gauti brėžiant gyvų ląstelių skaičių (10 000/ml) pagal auginimo laiką (h arba d).
Ląstelių koncentracijos ir gyvybingumo matavimas
1 paveikslas Vaizdai buvo užfiksuoti Countstar BioTech, nes ląstelės (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9 ir MDCK) suspensijoje buvo nudažytos atitinkamai Trypan Blue.
Countstar tinka ląstelėms, kurių skersmuo yra 5–180 um, pavyzdžiui, žinduolių ląstelėms, vabzdžių ląstelėms ir kai kuriems planktonams.
Ląstelių dydžio matavimas
2 pav. Ląstelių dydžio matavimas CHO ląstelių prieš ir po plazmidės transfekcijos.
A. CHO ląstelių suspensijos, nudažytos tripano mėlyna spalva, vaizdai prieš ir po plazmidės transfekcijos.
B. CHO ląstelių dydžio histogramos palyginimas prieš ir po plazmidės transfekcijos.
Ląstelių dydžio pokytis yra pagrindinis požymis ir dažniausiai matuojamas atliekant ląstelių tyrimus.Paprastai jis bus matuojamas atliekant šiuos eksperimentus: ląstelių transfekciją, vaistų testą ir ląstelių aktyvacijos tyrimus.Countstar pateikia statistinius morfologijos duomenis, pvz., ląstelių dydžius, per 20 sekundžių.
Countstar automatinis ląstelių skaitiklis gali pateikti ląstelių morfologinius duomenis, įskaitant apskritimo ir skersmens histogramas.
