Vzorka obsahujúca bunky v suspenzii sa zmieša s farbivom trypánovej modrej a potom sa natiahne do komorového podložného sklíčka Countstar analyzovaného pomocou Countstar Automated Cell Counter.Prístroje Countstar založené na klasickom princípe počítania buniek trypánovou modrou integrujú pokročilú technológiu optického zobrazovania, technológiu inteligentného rozpoznávania obrazu a výkonné softvérové algoritmy, aby poskytovali nielen koncentráciu buniek a životaschopnosť, ale poskytovali aj informácie o koncentrácii buniek, životaschopnosti, rýchlosti agregácie, kruhovitosti. a distribúcia priemeru iba s jedným chodom.
Agregovaná bunková analýza
Obrázok 3 Počítanie agregovaných buniek.
A. Obrázok vzorky bunky;
B. Obrázok vzorky buniek s identifikačnou značkou pomocou softvéru Countstar BioTech.(Zelený kruh: Živá bunka, Žltý kruh: Mŕtva bunka, Červený kruh: Agregovaná bunka).
C. Agregovaný histogram
Niektoré primárne bunky alebo bunky subkultúry sú náchylné na agregáciu, keď sú v zlom stave kultúry alebo pri nadmernom trávení, čo spôsobuje veľké ťažkosti pri počítaní buniek.Pomocou funkcie kalibrácie agregácie môže Countstar realizovať stimulačný výpočet agregácií na zabezpečenie presného počítania buniek a získať rýchlosť agregácie a histogram agregácie, čím poskytuje experimentátorom základ na posúdenie stavu buniek.
Monitorovanie rastu buniek
Obrázok 4 Krivka rastu buniek.
Krivka rastu buniek je bežnou metódou merania absolútneho rastu počtu buniek, dôležitým ukazovateľom na stanovenie koncentrácie buniek a jedným zo základných parametrov kultivácie základných biologických vlastností buniek.Aby bolo možné presne opísať dynamickú zmenu počtu buniek počas celého procesu, typickú rastovú krivku možno rozdeliť na 4 časti: inkubačná doba s pomalým rastom;fáza exponenciálneho rastu s veľkým sklonom, fáza plošiny a obdobie poklesu.Krivka rastu buniek sa môže získať vynesením počtu živých buniek (10 000/ml) oproti času kultivácie (h alebo d).
Meranie bunkovej koncentrácie a životaschopnosti
Obrázok 1 Obrázky boli zachytené pomocou Countstar BioTech, pretože bunky (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9 a MDCK) v suspenzii boli zafarbené trypánovou modrou.
Countstar je použiteľný pre bunky s priemerom medzi 5-180 um, ako sú cicavčie bunky, hmyzie bunky a niektoré planktóny.
Meranie veľkosti bunky
Obrázok 2 Meranie veľkosti buniek CHO buniek pred a po plazmidovej transfekcii.
A. Obrázky suspenzie CHO buniek farbených trypánovou modrou pred a po transfekcii plazmidov.
B. Porovnanie histogramu veľkosti CHO buniek pred a po transfekcii plazmidu.
Zmena veľkosti buniek je kľúčovým znakom a bežne sa meria pri výskume buniek.Normálne sa bude merať v týchto experimentoch: bunková transfekcia, test liečiv a testy bunkovej aktivácie.Countstar poskytuje štatistické morfologické údaje, ako sú veľkosti buniek, do 20 s.
Automatické počítadlo buniek Countstar môže poskytnúť morfologické údaje buniek vrátane histogramov kruhovitosti a priemeru.
