Una muestra que contiene células en suspensión se mezcla con colorante azul Trypan, luego se introduce en el portaobjetos de cámara analizado por el contador de células automatizado .Basado en el principio clásico de conteo de células azul tripán, los instrumentos de integran tecnología avanzada de imágenes ópticas, tecnología inteligente de reconocimiento de imágenes y potentes algoritmos de software para no solo proporcionar la concentración y viabilidad de las células, sino también proporcionar información sobre la concentración, viabilidad y tasa de agregación de las células. , redondez y distribución de diámetros con una sola corrida.
Análisis de células agregadas
Figura 3 Conteo de células agregadas.
A. Imagen de la muestra de células;
B. Imagen de muestra de células con marca de identificación del software .(Círculo verde: celda viva, círculo amarillo: celda muerta, círculo rojo: celda agregada).
C. Histograma agregado
Algunas células primarias o células de subcultivo son propensas a agregarse cuando el cultivo está en mal estado o se digiere excesivamente, lo que provoca una gran dificultad en el recuento de células.Con la función de calibración de agregación, puede realizar un cálculo de estimulación de agregaciones para garantizar un conteo de células preciso y obtener la tasa de agregación y el histograma de agregación, proporcionando así una base para que los experimentadores juzguen el estado de las células.
Monitoreo del crecimiento celular
Figura 4 Curva de crecimiento celular.
La curva de crecimiento celular es un método común para medir el crecimiento absoluto del número de células, un indicador importante para determinar la concentración celular y uno de los parámetros básicos para el cultivo de las propiedades biológicas básicas de las células.Para describir con precisión el cambio dinámico en el número de células a lo largo de todo el proceso, la curva de crecimiento típica se puede dividir en 4 partes: período de incubación con crecimiento lento;fase de crecimiento exponencial con gran pendiente, fase de meseta y período de declive.La curva de crecimiento celular puede obtenerse representando el número de células vivas (10.000/ml) frente al tiempo de cultivo (h o d).
Medición de la concentración y viabilidad de las células
Figura 1 Las imágenes fueron capturadas por Countstar BioTech mientras las células (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9 y MDCK) en suspensión se tiñeron con Trypan Blue respectivamente.
Countstar es aplicable a células con un diámetro de entre 5 y 180 um, como células de mamíferos, células de insectos y algunos plancton.
Medición del tamaño de celda
Figura 2 Medición del tamaño celular de las células CHO antes y después de la transfección del plásmido.
A. Imágenes de suspensión de células CHO teñidas con azul de tripano antes y después de la transfección del plásmido.
B. Comparación del histograma del tamaño de las células CHO antes y después de la transfección del plásmido.
El cambio del tamaño de la celda es una característica clave y se mide comúnmente en la investigación celular.Normalmente se medirá en estos experimentos: transfección celular, prueba de drogas y ensayos de activación celular. proporciona datos estadísticos de morfología, como el tamaño de las celdas, en 20 segundos.
El contador de células automatizado Countstar puede proporcionar los datos morfológicos de las células, incluidos los histogramas de circularidad y diámetro.
