Суспензиядагы клеткаларды камтыган үлгү Трипан көк боёгу менен аралашып, андан кийин Countstar Automated Cell Counter тарабынан талданган Countstar Chamber слайдына тартылат.Классикалык трипан көк клеткаларды эсептөө принцибинин негизинде, Countstar'тын аспаптары алдыңкы оптикалык сүрөттөө технологиясын, сүрөттү интеллектуалдык таануу технологиясын жана күчтүү программалык алгоритмдерди бириктирип, клетканын концентрациясын жана жашоого жөндөмдүүлүгүн гана камсыз кылбастан, ошондой эле клетканын концентрациясын, жашоого жөндөмдүүлүгүн, топтолуу ылдамдыгын, тегеректигин да камсыз кылат. , жана диаметри бир гана чуркап бөлүштүрүү.
Агрегацияланган клетка анализи
3-сүрөт Топтолгон клеткаларды эсептөө.
A. Клетка үлгүсүнүн сүрөтү;
B. Countstar BioTech программасы тарабынан идентификациялык белгиси бар клетка үлгүсүнүн сүрөтү.(Жашыл тегерек: тирүү клетка, сары тегерек: өлүк клетка, кызыл тегерек: бириктирилген клетка).
C. Агрегацияланган гистограмма
Кээ бир баштапкы клеткалар же субкультуралык клеткалар начар маданият абалында же ашыкча сиңирүү учурунда биригүүгө жакын болушат, бул клеткаларды эсептөөдө чоң кыйынчылыктарды жаратат.Агрегацияны калибрлөө функциясы менен Countstar клеткалардын так эсебин камсыз кылуу жана топтоо ылдамдыгын жана агрегация гистограммасын алуу үчүн агрегациялардын стимулдаштыруучу эсебин ишке ашыра алат, ошентип экспериментчилерге клеткалардын абалын баалоо үчүн негиз түзө алат.
Клетканын өсүшүнө мониторинг жүргүзүү
4-сүрөт Клетканын өсүү ийри сызыгы.
Клетканын өсүү ийри сызыгы – клетка санынын абсолюттук өсүшүн өлчөөнүн кеңири таралган ыкмасы, клетканын концентрациясын аныктоо үчүн маанилүү көрсөткүч жана клеткалардын негизги биологиялык касиеттерин культуралоо үчүн негизги параметрлердин бири.Бүткүл процесстеги клеткалардын санынын динамикалык өзгөрүшүн так сүрөттөп берүү үчүн типтүү өсүү ийри сызыгын 4 бөлүккө бөлүүгө болот: жай өсүү менен инкубациялык мезгил;чоң эңкейиш, плато фазасы жана төмөндөө мезгили менен экспоненциалдык өсүү фазасы.Клетканын өсүү ийри сызыгын тирүү клеткалардын санын (10'000/мл) культура убактысына (саат же d) каршы коюу менен алууга болот.
Клетканын концентрациясын жана жашоого жөндөмдүүлүгүн өлчөө
Сүрөт 1 Сүрөттөр Countstar BioTech тарабынан суспензиядагы клеткалар (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9 жана MDCK) тиешелүүлүгүнө жараша Trypan Blue менен боёлгон.
Countstar, сүт эмүүчүлөрдүн клеткасы, курт-кумурскалар жана кээ бир планктондор сыяктуу диаметри 5-180um ортосундагы клеткаларга тиешелүү.
Cell Size Measurement
2-сүрөт. Плазмиддик трансфекцияга чейин жана андан кийин CHO клеткаларынын клетка өлчөмүн өлчөө.
A. Плазмиддик трансфекцияга чейин жана андан кийин трипан көк түсү менен боёлгон CHO клеткаларынын суспензиясынын сүрөттөрү.
B. CHO клетка өлчөмү гистограммасын салыштыруу чейин жана плазмид transfection кийин.
Клетканын өлчөмүнүн өзгөрүшү негизги өзгөчөлүк болуп саналат жана көбүнчө клетка изилдөөдө өлчөнөт.Адатта ал бул эксперименттерде өлчөнөт: клетканы трансфекциялоо, дары тести жана клетканы активдештирүү анализдери.Countstar 20s ичинде клеткалардын өлчөмдөрү сыяктуу статистикалык морфология маалыматтарын берет.
Countstar автоматташтырылган клетка эсептегичи клеткалардын морфологиялык маалыматтарын, анын ичинде тегерек жана диаметр гистограммаларын бере алат.
