Uzorak koji sadrži ćelije u suspenziji se miješa sa Trypan plavom bojom, a zatim se uvlači u Countstar Chamber Slide analiziran pomoću Countstar Automated Cell Counter.Bazirani na klasičnom principu brojanja tripan plavih ćelija, Countstarovi instrumenti integriraju naprednu tehnologiju optičkog snimanja, inteligentnu tehnologiju prepoznavanja slike i moćne softverske algoritme ne samo da obezbjeđuju koncentraciju i održivost ćelije, već i daju informacije o koncentraciji ćelije, vitalnosti, stopi agregacije, zaobljenosti , i raspodjela promjera sa samo jednom vožnjom.
Agregirana ćelijska analiza
Slika 3 Brojanje agregiranih ćelija.
A. Slika uzorka ćelije;
B. Slika uzorka ćelije sa identifikacionom oznakom softvera Countstar BioTech.(Zeleni krug: živa ćelija, žuti krug: mrtva ćelija, crveni krug: agregirana ćelija).
C. Agregirani histogram
Neke primarne ćelije ili ćelije subkulture su sklone agregaciji u lošem stanju kulture ili prekomernoj probavi, što uzrokuje velike poteškoće u brojanju ćelija.Sa funkcijom kalibracije agregacije, Countstar može realizirati stimulacijski proračun agregacija kako bi osigurao precizno brojanje ćelija i dobio stopu agregacije i histogram agregacije, pružajući tako osnovu eksperimentatorima da procijene stanje ćelija.
Praćenje rasta ćelija
Slika 4. Kriva rasta ćelija.
Kriva ćelijskog rasta je uobičajena metoda za mjerenje apsolutnog rasta broja ćelija, važan indikator za određivanje koncentracije ćelija i jedan od osnovnih parametara za kulturu osnovnih bioloških svojstava ćelija.Kako bi se precizno opisala dinamička promjena broja ćelija tokom cijelog procesa, tipična krivulja rasta može se podijeliti na 4 dijela: period inkubacije sa sporim rastom;faza eksponencijalnog rasta sa velikim nagibom, faza platoa i period opadanja.Krivulja rasta ćelija može se dobiti grafikom broja živih ćelija (10'000/mL) u odnosu na vreme kulture (h ili d).
Mjerenje koncentracije i održivosti ćelija
Slika 1. Slike su snimljene Countstar BioTech-om jer su ćelije (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9 i MDCK) u suspenziji obojene Trypan Blue-om.
Countstar je primjenjiv na ćelije promjera između 5-180um, kao što su ćelije sisara, ćelije insekata i neki planktoni.
Mjerenje veličine ćelije
Slika 2. Mjerenje veličine ćelije CHO stanica prije i poslije transfekcije plazmidom.
A. Slike suspenzije CHO stanica obojene tripan plavim prije i poslije transfekcije plazmida.
B. Poređenje histograma veličine CHO ćelija prije i poslije transfekcije plazmida.
Promjena veličine ćelije je ključna karakteristika i obično se mjeri u istraživanju ćelija.Obično će se mjeriti u ovim eksperimentima: transfekcija ćelija, test na lijekove i testovi aktivacije stanica.Countstar pruža statističke podatke o morfologiji, kao što su veličine ćelija, unutar 20s.
Countstar automatski brojač ćelija može dati morfološke podatke ćelija, uključujući histograme kružnosti i promjera.
