Mezenchymálne kmeňové bunky sú podskupinou pluripotentných kmeňových buniek, ktoré možno izolovať z mezodermu.Vďaka svojej obnove sebareplikácie a viacsmernej diferenciácii majú vysoký potenciál pre rôzne terapie v medicíne.Mezenchymálne kmeňové bunky majú jedinečný imunitný fenotyp a schopnosť imunitnej regulácie.Mezenchymálne kmeňové bunky sa preto už široko používajú pri transplantáciách kmeňových buniek, tkanivovom inžinierstve a transplantáciách orgánov.A okrem týchto aplikácií sa používajú ako ideálny nástroj v tkanivovom inžinierstve ako očkovacie bunky v sérii základných a klinických výskumných experimentov.
Countstar Rigel môže monitorovať koncentráciu, životaschopnosť, analýzu apoptózy a fenotypové charakteristiky (a ich zmeny) počas produkcie a diferenciácie týchto kmeňových buniek.Countstar Rigel má tiež výhodu v získavaní dodatočných morfologických informácií, poskytovaných permanentným jasným poľom a záznamom obrazu na báze fluorescencie počas celého procesu monitorovania kvality buniek.Countstar Rigel ponúka rýchlu, sofistikovanú a spoľahlivú metódu kontroly kvality kmeňových buniek.
Monitorovanie životaschopnosti MSC v regeneratívnej medicíne
Obrázok 1 Monitorovanie životaschopnosti a bunkového počtu mezenchymálnych kmeňových buniek (MSC) na použitie v bunkových terapiách
Kmeňové bunky sú jedným z najsľubnejších spôsobov liečby regeneračných buniek.Od zberu MSC až po ošetrenie je dôležité udržať vysokú životaschopnosť kmeňových buniek počas všetkých krokov produkcie kmeňových buniek (obrázok 1).Počítadlo kmeňových buniek Countstar monitoruje životaschopnosť a koncentráciu kmeňových buniek, aby zohrávalo rozhodujúcu úlohu pri kontrole kvality.
Monitorovanie morfologických zmien MSC po transporte
Priemer a agregácia boli tiež určené Countstar Rigel.Priemer AdMSC sa po preprave drasticky zmenil v porovnaní s pred prepravou.Priemer pred transportom bol 19 um, ale po transporte sa zvýšil na 21 um.Agregácia pred prepravou bola 20 %, ale po preprave sa zvýšila na 25 %.Z obrázkov, ktoré zachytil Countstar Rigel, sa fenotyp AdMSC po preprave drasticky zmenil.Výsledky sú znázornené na obrázku 3.
Identifikácia AdMSC v bunkovom fenotype
V súčasnosti sú minimálne štandardné identifikačné testovacie postupy na zabezpečenie kvality monitorovaných MSC uvedené vo vyhlásení Medzinárodnej spoločnosti pre bunkovú terapiu (ISCT), definovanom už v roku 2006.
Rýchla detekcia apoptózy v MSC s FITC konjugovaným anexínom-V a 7-ADD Úvod
Bunkovú apoptózu možno detegovať pomocou FITC konjugovaného anexínu-V a 7-ADD.PS sa normálne nachádza iba na intracelulárnom letáku plazmatickej membrány v zdravých bunkách, ale počas skorej apoptózy sa asymetria membrány stráca a PS sa premiestňuje do vonkajšieho letáku.
Obrázok 6 Detekcia apoptózy v MSC pomocou Countstar Rigel
A. Vizuálna kontrola fluorescenčného obrazu detekcie apoptózy v MSC
B. Rozptylové grafy apoptózy v MSC expresne FCS
C. Percento bunkovej populácie na základe % normálnych, % apoptotických a % nekrotických/veľmi neskorých apoptotických buniek.
