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Determinación de viabilidad, morfología y fenotipo para terapia con células madre

Las células madre mesenquimales son un subconjunto de células madre pluripotentes que se pueden aislar del mesodermo.Con sus características de renovación de autorreplicación y diferenciación multidireccional, poseen un alto potencial para diversas terapias en medicina.Las células madre mesenquimales tienen un fenotipo inmunitario único y una capacidad de regulación inmunitaria.Por lo tanto, las células madre mesenquimales ya se utilizan ampliamente en trasplantes de células madre, ingeniería de tejidos y trasplante de órganos.Y más allá de estas aplicaciones, se utilizan como una herramienta ideal en la ingeniería de tejidos como células sembradoras en una serie de experimentos de investigación básicos y clínicos.

El puede monitorear la concentración, viabilidad, análisis de apoptosis y características fenotípicas (y sus cambios) durante la producción y diferenciación de estas células madre.El también tiene la ventaja de obtener información morfológica adicional, proporcionada por el campo brillante permanente y las grabaciones de imágenes basadas en fluorescencia durante todo el proceso de monitoreo de la calidad celular. ofrece un método rápido, sofisticado y fiable para el control de calidad de las células madre.

 

 

Supervisión de la viabilidad de las MSC en medicina regenerativa

 

Figura 1 Monitoreo de viabilidad y conteo celular de células madre mesenquimales (MSCs) para uso en terapias celulares

 

Stem Cell es uno de los tratamientos más prometedores en terapias celulares regenerativas.Desde la recolección de MSC hasta el tratamiento, es importante mantener una alta viabilidad de las células madre durante todos los pasos de la producción de células madre (Figura 1).El contador de células madre de monitorea la viabilidad y la concentración de células madre para desempeñar un papel crítico en el control de calidad.

 

 

Monitoreo de cambios morfológicos de MSC después del transporte

 

El diámetro y la agregación también fueron determinados por .El diámetro de las AdMSC cambió drásticamente después del transporte en comparación con antes del transporte.El diámetro antes del transporte era de 19 µm, pero aumentó a 21 µm después del transporte.La agregación de antes del transporte fue del 20%, pero aumentó al 25% después del transporte.A partir de las imágenes capturadas por , el fenotipo de AdMSC cambió drásticamente después del transporte.Los resultados se muestran en la Figura 3.

 

 

Identificación de AdMSC en fenotipo celular

Actualmente, los procedimientos de prueba de identificación estándar mínimos para la garantía de calidad de las MSC monitoreadas se enumeran en una declaración de la Sociedad Internacional de Terapia Celular (ISCT), definida ya en 2006.

 

 

Detección rápida de apoptosis en MSC con anexina-V conjugada con FITC y 7-ADD Introducción

La apoptosis celular se puede detectar con anexina-V conjugada con FITC y 7-ADD.La PS normalmente solo se encuentra en la hoja intracelular de la membrana plasmática en células sanas, pero durante la apoptosis temprana, la asimetría de la membrana se pierde y la PS se traslada a la hoja externa.

 

Figura 6 Detección de apoptosis en MSC por Countstar Rigel

A. Inspección visual de la imagen de fluorescencia de Detección de apoptosis en MSC
B. Gráficos de dispersión de apoptosis en MSC por FCS express
C. Porcentaje de población celular basado en % de células normales, % apoptóticas y % necróticas/apoptóticas en etapa muy tardía.

 

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