Mezenchymální kmenové buňky jsou podskupinou pluripotentních kmenových buněk, které lze izolovat z mezodermu.Díky své obnově sebereplikace a vícesměrné diferenciaci mají vysoký potenciál pro různé terapie v medicíně.Mezenchymální kmenové buňky mají jedinečný imunitní fenotyp a schopnost imunitní regulace.Mezenchymální kmenové buňky jsou proto již široce používány při transplantacích kmenových buněk, tkáňovém inženýrství a transplantacích orgánů.A kromě těchto aplikací se používají jako ideální nástroj v tkáňovém inženýrství jako zárodečné buňky v řadě základních a klinických výzkumných experimentů.
Countstar Rigel může monitorovat koncentraci, životaschopnost, analýzu apoptózy a fenotypové charakteristiky (a jejich změny) během produkce a diferenciace těchto kmenových buněk.Countstar Rigel má také výhodu v získávání dalších morfologických informací, poskytovaných permanentním jasným polem a záznamem obrazu na bázi fluorescence během celého procesu monitorování kvality buněk.Countstar Rigel nabízí rychlou, sofistikovanou a spolehlivou metodu kontroly kvality kmenových buněk.
Monitorování životaschopnosti MSC v regenerativní medicíně
Obrázek 1 Monitorování životaschopnosti a počtu buněk mezenchymálních kmenových buněk (MSC) pro použití v buněčných terapiích
Kmenové buňky jsou jedním z nejslibnějších způsobů léčby regenerativních buněk.Od sklizně MSC až po ošetření je důležité udržet vysokou životaschopnost kmenových buněk během všech kroků produkce kmenových buněk (obrázek 1).Čítač kmenových buněk Countstar monitoruje životaschopnost a koncentraci kmenových buněk a hraje klíčovou roli při kontrole kvality.
Monitorování morfologických změn MSC po přepravě
Průměr a agregace byly také určeny Countstar Rigel.Průměr AdMSC se po přepravě drasticky změnil ve srovnání s před přepravou.Průměr před transportem byl 19 um, ale po transportu se zvýšil na 21 um.Agregace před přepravou byla 20 %, ale po přepravě se zvýšila na 25 %.Ze snímků, které pořídil Countstar Rigel, se fenotyp AdMSC po transportu drasticky změnil.Výsledky jsou znázorněny na obrázku 3.
Identifikace AdMSC v buněčném fenotypu
V současné době jsou minimální standardní identifikační testovací postupy pro zajištění kvality monitorovaných MSC uvedeny v prohlášení Mezinárodní společnosti pro buněčnou terapii (ISCT), definovaném již v roce 2006.
Rychlá detekce apoptózy v MSC pomocí FITC konjugovaného annexinu-V a 7-ADD Úvod
Apoptózu buněk lze detekovat pomocí FITC konjugovaného annexinu-V a 7-ADD.PS se normálně nachází pouze na intracelulárním letáku plazmatické membrány u zdravých buněk, ale během časné apoptózy se asymetrie membrány ztrácí a PS se přemístí do vnějšího letáku.
Obrázek 6 Detekce apoptózy v MSC pomocí Countstar Rigel
A. Vizuální kontrola fluorescenčního obrazu Detekce apoptózy v MSC
B. Bodové grafy apoptózy v MSC pomocí FCS expres
C. Procento buněčné populace založené na % normálních, % apoptotických a % nekrotických/velmi pozdních apoptotických buněk.
