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幹細胞治療の生存率、形態および表現型の決定

間葉系幹細胞は、中胚葉から分離できる多能性幹細胞のサブセットです。自己複製の更新と多方向の分化特性により、医学におけるさまざまな治療法の可能性が高くなっています。間葉系幹細胞は、独特の免疫表現型と免疫調節能力を持っています。したがって、間葉系幹細胞は、幹細胞移植、組織工学、臓器移植ですでに広く使用されています。そして、これらのアプリケーションを超えて、それらは一連の基礎および臨床研究実験におけるシーダー細胞として組織工学の理想的なツールとして使用されます。

は、これらの幹細胞の産生および分化中に、濃度、生存率、アポトーシス分析、および表現型の特性(およびそれらの変化)を監視できます。は、細胞品質モニタリングの全プロセス中に恒久的な明視野と蛍光ベースの画像記録によって提供される追加の形態学的情報を取得するという利点もあります。は、幹細胞の品質管理のための高速で洗練された信頼性の高い方法を提供します。

 

 

再生医療におけるMSCの実行可能性の監視

 

図1細胞治療で使用するための間葉系幹細胞(MSC)の生存率と細胞数のモニタリング

 

幹細胞は、再生細胞治療において最も有望な治療法の1つです。MSCの採取から治療まで、幹細胞産生のすべての段階で高い幹細胞生存率を維持することが重要です(図1)。の幹細胞カウンターは、幹細胞の生存率と濃度を監視して、品質管理において重要な役割を果たします。

 

 

輸送後のMSCの形態変化のモニタリング

 

直径と凝集もによって決定されました。AdMSCの直径は、輸送前と比較して輸送後に大幅に変化しました。輸送前の直径は19μmでしたが、輸送後は21μmに増加しました。輸送前の集計は20%でしたが、輸送後は25%に増加しました。が撮影した画像から、AdMSCの表現型は輸送後に大幅に変化しました。結果を図3に示しました。

 

 

細胞表現型におけるAdMSCの同定

現在、監視対象のMSCの品質保証のための最低限の標準識別テスト手順は、2006年にすでに定義されている国際細胞治療学会(ISCT)の声明に記載されています。

 

 

FITC結合アネキシンVおよび7-ADDによるMSCのアポトーシスの迅速な検出はじめに

細胞アポトーシスは、FITC結合アネキシンVおよび7-ADDで検出できます。PSは通常、健康な細胞の原形質膜の細胞内小葉にのみ見られますが、初期のアポトーシスの間に、膜の非対称性が失われ、PSは外部の小葉に移動します。

 

図Countstar RigelによるMSCのアポトーシスの検出

A.MSCにおけるアポトーシスの検出の蛍光画像の目視検査
B.FCSエクスプレスによるMSCのアポトーシスの散布図
C.%正常、%アポトーシス、および%壊死/非常に後期のアポトーシス細胞に基づく細胞集団のパーセンテージ。

 

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