تعیین زنده ماندن، مورفولوژی و فنوتیپ برای درمان با سلول های بنیادی

سلول های بنیادی مزانشیمی زیرمجموعه ای از سلول های بنیادی پرتوان هستند که می توانند از مزودرم جدا شوند.با ویژگی‌های تجدید خود تکراری و تمایز چند جهتی، پتانسیل بالایی برای درمان‌های مختلف در پزشکی دارند.سلول های بنیادی مزانشیمی دارای فنوتیپ ایمنی منحصر به فرد و توانایی تنظیم ایمنی هستند.بنابراین، سلول های بنیادی مزانشیمی در حال حاضر به طور گسترده در پیوند سلول های بنیادی، مهندسی بافت و پیوند اعضا استفاده می شود.و فراتر از این کاربردها، آنها به عنوان یک ابزار ایده آل در مهندسی بافت به عنوان سلول های بذر در یک سری آزمایش های تحقیقاتی پایه و بالینی استفاده می شوند.

Countstar Rigel می تواند غلظت، زنده ماندن، تجزیه و تحلیل آپوپتوز و ویژگی های فنوتیپ (و تغییرات آنها) را در طول تولید و تمایز این سلول های بنیادی کنترل کند.Countstar Rigel همچنین دارای مزیت در به دست آوردن اطلاعات مورفولوژیکی اضافی است که توسط میدان روشن دائمی و ضبط تصویر مبتنی بر فلورسانس در طول کل فرآیند نظارت بر کیفیت سلول ارائه می شود.Countstar Rigel یک روش سریع، پیچیده و قابل اعتماد برای کنترل کیفیت سلول های بنیادی ارائه می دهد.

پایش بقای سلول های بنیادی مزانشیمی در پزشکی بازساختی

شکل 1 نظارت بر زنده ماندن و تعداد سلول های سلول های بنیادی مزانشیمی (MSCs) برای استفاده در سلول درمانی

سلول های بنیادی یکی از امیدوارکننده ترین درمان ها در درمان سلول های ترمیمی است.از برداشت سلول‌های بنیادی مزانشیمی تا درمان، حفظ زنده‌مانی بالای سلول‌های بنیادی در تمام مراحل تولید سلول‌های بنیادی مهم است (شکل 1).شمارنده سلول های بنیادی Countstar، زنده ماندن و غلظت سلول های بنیادی را کنترل می کند تا نقش مهمی در کنترل کیفیت ایفا کند.

نظارت بر تغییرات مورفولوژیکی MSC پس از حمل و نقل

قطر و تجمع نیز توسط Countstar Rigel تعیین شد.قطر AdMSCها پس از حمل و نقل در مقایسه با قبل از حمل به شدت تغییر کرد.قطر قبل از انتقال 19 میکرومتر بود، اما پس از انتقال به 21 میکرومتر افزایش یافت.تجمع قبل از حمل و نقل 20 درصد بود، اما پس از حمل به 25 درصد افزایش یافت.از تصاویر گرفته شده توسط Countstar Rigel، فنوتیپ AdMSCها پس از حمل و نقل به شدت تغییر کرد.نتایج در شکل 3 نشان داده شده است.

شناسایی AdMSCها در فنوتیپ سلولی

در حال حاضر حداقل روش‌های تست شناسایی استاندارد برای تضمین کیفیت سلول‌های بنیادی مزانشیمی تحت نظارت در بیانیه‌ای از انجمن بین‌المللی سلول‌درمانی (ISCT)، که قبلاً در سال 2006 تعریف شده است، فهرست شده‌اند.

تشخیص سریع آپوپتوز در سلول های بنیادی مزانشیمی با FITC Conjugated Annexin-V و 7-ADD مقدمه

آپوپتوز سلولی را می توان با انکسین کونژوگه FITC و 7-ADD تشخیص داد.PS به طور معمول فقط بر روی برگچه داخل سلولی غشای پلاسمایی در سلول های سالم یافت می شود، اما در طی آپوپتوز اولیه، عدم تقارن غشایی از بین می رود و PS به برگچه خارجی منتقل می شود.

شکل 6 تشخیص آپوپتوز در سلول های بنیادی مزانشیمی توسط Countstar Rigel

الف. بازرسی بصری تصویر فلورسانس تشخیص آپوپتوز در سلول های بنیادی مزانشیمی
ب. نمودارهای پراکنده آپوپتوز در سلول های بنیادی مزانشیمی توسط FCS express
ج- درصد جمعیت سلولی بر اساس % سلولهای آپوپتوز نرمال، % آپوپتوز و % نکروز/مرحله بسیار دیررس.