A mezenchimális őssejtek a pluripotens őssejtek egy részhalmaza, amely izolálható a mezodermából.Önreplikáció-megújító képességükkel és többirányú differenciálódási jellemzőikkel nagy potenciállal rendelkeznek az orvostudomány különféle terápiáiban.A mezenchimális őssejtek egyedi immunfenotípussal és immunszabályozó képességgel rendelkeznek.Ezért a mezenchimális őssejteket már széles körben használják az őssejt-transzplantációban, a szövettervezésben és a szervátültetésben.Ezeken az alkalmazásokon túlmenően ideális eszközként használják a szövetfejlesztésben, mint vetősejteket számos alap- és klinikai kutatási kísérlet során.
A Countstar Rigel nyomon követheti ezen őssejtek koncentrációját, életképességét, apoptózisanalízisét és fenotípus jellemzőit (és ezek változásait) ezen őssejtek termelése és differenciálódása során.A Countstar Rigel előnye az is, hogy további morfológiai információkhoz jut, amelyeket az állandó fényes mező és a fluoreszcencia alapú képfelvételek biztosítanak a sejtminőség monitorozás teljes folyamata során.A Countstar Rigel gyors, kifinomult és megbízható módszert kínál az őssejtek minőségének ellenőrzésére.
Az MSC-k életképességének monitorozása a regeneratív gyógyászatban
1. ábra A mezenchimális őssejtek (MSC) életképességének és sejtszámának monitorozása sejtterápiákban történő felhasználás céljából
Az őssejt a regeneratív sejtterápiák egyik legígéretesebb kezelési módja.Az MSC begyűjtésétől a kezelésig fontos a magas őssejt-életképesség fenntartása az őssejttermelés minden lépésében (1. ábra).A Countstar őssejtszámlálója figyeli az őssejtek életképességét és koncentrációját, hogy kritikus szerepet játsszon a minőségellenőrzésben.
Az MSC morfológiai változásainak monitorozása a szállítás után
Az átmérőt és az aggregációt is Countstar Rigel határozta meg.Az AdMSC-k átmérője drasztikusan megváltozott a szállítás után a szállítás előttihez képest.Az átmérő a szállítás előtt 19 µm volt, de a szállítás után 21 µm-re nőtt.A szállítás előtti összesítés 20%, de a szállítás után 25%-ra nőtt.A Countstar Rigel által rögzített képek alapján az AdMSC-k fenotípusa drasztikusan megváltozott a szállítás után.Az eredményeket a 3. ábra mutatja.
AdMSC-k azonosítása sejtfenotípusban
Jelenleg a monitorozott MSC-k minőségbiztosításának minimális szabványos azonosítási vizsgálati eljárásait az International Society for Cellular Therapy (ISCT) már 2006-ban meghatározott nyilatkozata tartalmazza.
Apoptózis gyors kimutatása MSC-ben FITC-konjugált Annexin-V és 7-ADD bevezetésével
A sejtapoptózis kimutatható FITC-vel konjugált annexin-V-vel és 7-ADD-vel.A PS normál esetben csak a plazmamembrán intracelluláris szórólapján található egészséges sejtekben, de a korai apoptózis során a membrán aszimmetriája megszűnik, és a PS a külső levélre transzlokálódik.
6. ábra: Apoptózis kimutatása MSC-ben Countstar Rigel által
A. Az apoptózis kimutatása MSC-ben fluoreszcens képének vizuális ellenőrzése
B. Az apoptózis szórásdiagramja MSC-ben FCS expressz segítségével
C. A sejtpopuláció százalékos aránya a % normál, % apoptotikus és % nekrotikus/nagyon késői stádiumú apoptotikus sejtek alapján.
