Mezenchymalne komórki macierzyste stanowią podzbiór pluripotencjalnych komórek macierzystych, które można wyizolować z mezodermy.Dzięki ich samoreplikacji i wielokierunkowej charakterystyce różnicowania mają duży potencjał dla różnych terapii w medycynie.Mezenchymalne komórki macierzyste mają unikalny fenotyp immunologiczny i zdolność regulacji immunologicznej.Dlatego mezenchymalne komórki macierzyste są już szeroko stosowane w przeszczepianiu komórek macierzystych, inżynierii tkankowej i przeszczepianiu narządów.Poza tymi zastosowaniami są one wykorzystywane jako idealne narzędzie w inżynierii tkankowej jako komórki rozsiewające w serii podstawowych i klinicznych eksperymentów badawczych.
Countstar Rigel może monitorować stężenie, żywotność, analizę apoptozy i cechy fenotypowe (i ich zmiany) podczas produkcji i różnicowania tych komórek macierzystych.Countstar Rigel ma również tę zaletę, że uzyskuje dodatkowe informacje morfologiczne, zapewniane przez stałe jasne pole i zapis obrazu oparty na fluorescencji podczas całego procesu monitorowania jakości komórek.Countstar Rigel oferuje szybką, wyrafinowaną i niezawodną metodę kontroli jakości komórek macierzystych.
Monitorowanie żywotności MSC w medycynie regeneracyjnej
Rycina 1 Monitorowanie żywotności i liczby komórek mezenchymalnych komórek macierzystych (MSC) do stosowania w terapiach komórkowych
Komórka Macierzysta to jeden z najbardziej obiecujących sposobów leczenia komórek regeneracyjnych.Od zebrania MSC do leczenia, ważne jest utrzymanie wysokiej żywotności komórek macierzystych na wszystkich etapach produkcji komórek macierzystych (ryc. 1).Licznik komórek macierzystych Countstar monitoruje żywotność i koncentrację komórek macierzystych, aby odgrywać kluczową rolę w kontroli jakości.
Monitorowanie zmian morfologicznych MSC po transporcie
Średnicę i agregację określił również Countstar Rigel.Średnica AdMSC zmieniła się drastycznie po transporcie w porównaniu z przed transportem.Średnica przed transportem wynosiła 19 µm, ale po transporcie wzrosła do 21 µm.Agregacja przed transportem wynosiła 20%, ale po transporcie wzrosła do 25%.Na podstawie zdjęć zarejestrowanych przez Countstara Rigela fenotyp AdMSC uległ drastycznej zmianie po transporcie.Wyniki przedstawiono na rysunku 3.
Identyfikacja AdMSC w fenotypie komórki
Obecnie minimalne standardowe procedury testów identyfikacyjnych dla zapewnienia jakości monitorowanych komórek MSC są wymienione w oświadczeniu Międzynarodowego Towarzystwa Terapii Komórkowej (ISCT), zdefiniowanym już w 2006 roku.
Szybkie wykrywanie apoptozy w MSC za pomocą sprzężonej z FITC aneksyny V i 7-ADD Wprowadzenie
Apoptozę komórek można wykryć za pomocą sprzężonej z FITC aneksyny V i 7-ADD.PS jest normalnie znajdowane tylko na płatku wewnątrzkomórkowym błony komórkowej zdrowych komórek, ale podczas wczesnej apoptozy asymetria błony jest tracona i PS przemieszcza się do płatka zewnętrznego.
Rysunek 6 Wykrywanie apoptozy w MSC przez Countstar Rigel
A. Wizualna inspekcja obrazu fluorescencyjnego wykrywania apoptozy w MSC
B. Wykresy punktowe apoptozy w MSC metodą FCS express
C. Procent populacji komórek na podstawie % komórek prawidłowych, % komórek apoptotycznych i % komórek martwiczych/bardzo późnego stadium apoptozy.
