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Détermination de la viabilité, de la morphologie et du phénotype pour la thérapie par cellules souches

Les cellules souches mésenchymateuses sont un sous-ensemble de cellules souches pluripotentes qui peuvent être isolées du mésoderme.Avec leurs caractéristiques de renouvellement d'auto-réplication et de différenciation multidirectionnelle, ils possèdent un potentiel élevé pour diverses thérapies en médecine.Les cellules souches mésenchymateuses ont un phénotype immunitaire unique et une capacité de régulation immunitaire.Par conséquent, les cellules souches mésenchymateuses sont déjà largement utilisées dans les greffes de cellules souches, l'ingénierie tissulaire et la transplantation d'organes.Et au-delà de ces applications, elles sont utilisées comme un outil idéal en ingénierie tissulaire en tant que cellules semeuses dans une série d'expériences de recherche fondamentale et clinique.

Le peut surveiller la concentration, la viabilité, l'analyse de l'apoptose et les caractéristiques phénotypiques (et leurs modifications) pendant la production et la différenciation de ces cellules souches.Le a également l'avantage d'obtenir des informations morphologiques supplémentaires, fournies par les enregistrements d'images permanents en champ clair et en fluorescence pendant tout le processus de surveillance de la qualité des cellules.Le offre une méthode rapide, sophistiquée et fiable pour le contrôle qualité des cellules souches.

 

 

Surveillance de la viabilité des CSM en médecine régénérative

 

Figure 1 Surveillance de la viabilité et du nombre de cellules des cellules souches mésenchymateuses (MSC) pour une utilisation dans les thérapies cellulaires

 

La cellule souche est l'un des traitements les plus prometteurs dans les thérapies cellulaires régénératives.De la récolte de MSC au traitement, il est important de maintenir une viabilité élevée des cellules souches à toutes les étapes de la production de cellules souches (Figure 1).Le compteur de cellules souches de surveille la viabilité et la concentration des cellules souches pour jouer un rôle essentiel dans le contrôle de la qualité.

 

 

Surveillance des changements morphologiques du MSC après le transport

 

Le diamètre et l'agrégation ont également été déterminés par .Le diamètre des AdMSC a été radicalement modifié après le transport par rapport à avant le transport.Le diamètre avant le transport était de 19 µm, mais il a augmenté à 21 µm après le transport.L'agrégation avant le transport était de 20 %, mais elle est passée à 25 % après le transport.D'après les images capturées par , le phénotype des AdMSC a été radicalement modifié après le transport.Les résultats ont été présentés à la figure 3.

 

 

Identification des AdMSC dans le phénotype cellulaire

Actuellement, les procédures de test d'identification standard minimales pour l'assurance qualité des MSC surveillés sont répertoriées dans une déclaration de la Société internationale de thérapie cellulaire (ISCT), déjà définie en 2006.

 

 

Détection rapide de l'apoptose dans les MSC avec l'annexine-V conjuguée au FITC et le 7-ADD Introduction

L'apoptose cellulaire peut être détectée avec l'annexine-V conjuguée au FITC et le 7-ADD.La PS ne se trouve normalement que sur le feuillet intracellulaire de la membrane plasmique dans les cellules saines, mais au début de l'apoptose, l'asymétrie membranaire est perdue et la PS se transloque vers le feuillet externe.

 

Figure 6 Détection de l'apoptose dans les CSM par Countstar Rigel

A. Inspection visuelle de l'image de fluorescence de la détection de l'apoptose dans les MSC
B. Diagrammes de dispersion de l'apoptose dans les MSC par FCS express
C. Pourcentage de la population cellulaire basé sur % de cellules normales, % apoptotiques et % de cellules apoptotiques nécrotiques/à un stade très avancé.

 

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