Imunofenotypizační analýza je typický experiment prováděný v oblastech výzkumu souvisejících s buňkami k diagnostice různých onemocnění (autoimunitní onemocnění, imunodeficitní onemocnění, diagnostika nádorů, hemostáza, alergická onemocnění a mnoho dalších) a patologie onemocnění.Používá se také k testování kvality buněk při výzkumu různých buněčných chorob.Průtoková cytometrie a fluorescenční mikroskop jsou rutinními analytickými metodami v ústavech pro výzkum buněčných chorob, které se používají pro imunofenotypizaci.Tyto analytické metody však mohou poskytovat pouze snímky nebo datové řady, které nemusí splňovat přísné požadavky na schválení regulačních orgánů.
M Dominici el, Cytoterapie (2006) sv.8, č. 4, 315-317
Identifikace imunofenotypu AdMSC
Imunofenotyp AdMSC byl stanoven pomocí Countstar FL, AdMSC byly inkubovány s různými protilátkami (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105 a HLADR).Postup aplikace signální barvy byl vytvořen nastavením zeleného kanálu na zobrazení fluorescence PE a jasného pole.Referenční segmentace obrazu ve světlém poli byla použita jako maska pro vzorkování PE fluorescenčního signálu.Byly ukázány výsledky CD105 (obrázek 1).
Obrázek 1 Identifikace imunofenotypu AdMSC.A. Jasné pole a fluorescenční obraz AdMSC;B. Detekce CD markerů AdMSC společností Countstar FL
Kontrola kvality MSC – validace výsledků pro každou jednotlivou buňku
Obrázek 2 A: Výsledky Countstar FL byly zobrazeny v FCS express 5plus, ohrazení pozitivního procenta CD105 a přehledová tabulka jednotlivých buněk.B: Upraveno hradlování na pravou stranu, obrázky tabulky jednotlivých buněk ukazují buňky s vysokou expresí CD105.C: Upraveno hradlování na levou stranu, tabulka obrázků jednotlivých buněk ukazuje buňky s nízkou expresí CD105.
Fenotypické změny během transportu
Obrázek 3. A: Kvantitativní analýza pozitivního procenta CD105 v různých vzorcích pomocí softwaru FCS express 5 plus.B: Vysoce kvalitní snímky poskytují další morfologické informace.C: Ověřené výsledky pomocí miniatur každé jednotlivé buňky, softwarové nástroje FCS rozdělily buňky do různých
