Immunfenotypningsanalys är ett typiskt experiment som utförs inom cellrelaterade forskningsfält för att diagnostisera olika sjukdomar (autoimmuna sjukdomar, immunbristsjukdom, tumördiagnos, hemostas, allergiska sjukdomar och många fler) och sjukdomspatologi.Det används också för att testa cellkvaliteten i olika cellsjukdomsforskning.Flödescytometri och fluorescensmikroskop är de rutinmässiga analysmetoderna i cellsjukdomsforskningsinstitut som används för immunfenotypning.Men dessa analysmetoder kan antingen tillhandahålla endast bilder eller dataserier, som kanske inte uppfyller de strikta godkännandekraven från tillsynsmyndigheterna.
M Dominici el, Cytoterapi (2006) Vol.8, nr 4, 315-317
Identifiering av immunfenotyp av AdMSCs
Immunfenotypen av AdMSCs bestämdes av Countstar FL, AdMSCs inkuberades med olika antikroppar (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105 och HLADR).En signal-färg applicering procedur skapades genom att ställa in grön kanal till bild PE fluorescens, plus ett ljust fält.Ljusfältsbildreferenssegmentering applicerades som en mask för att prova PE-fluorescenssignalen.Resultaten av CD105 visades (Figur 1).
Figur 1 Identifiering av immunfenotyp av AdMSCs.A. Bright Field and Fluorescence Image of AdMSCs;B. CD-markördetektering av AdMSCs av Countstar FL
Kvalitetskontroll av MSC:er – validering av resultat för varje enskild cell
Figur 2 A: Countstar FL-resultaten visades i FCS express 5plus, med den positiva procentandelen av CD105 och översiktstabellen enstaka celler.B: Justerad gating till höger sida, bilderna av encellstabellen visar de celler med högt uttryck av CD105.C: Justerad gating till vänster sida, bilderna av encellstabellen visar de celler med lågt uttryck av CD105.
Fenotypiska förändringar under transport
Figur 3. A: Kvantitativ analys av den positiva procentandelen CD105 i olika prover med programvaran FCS express 5 plus.B: Bilder av hög kvalitet ger ytterligare morfologisk information.C: Validerade resultat med miniatyrbilder av varje enskild cell, FCS-programvaruverktygen delade upp cellerna i olika
