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काउंटस्टार FL . द्वारा AdMSCs के इम्यूनो-फेनोटाइप का निर्धारण करें

इम्यूनो-फेनोटाइपिंग विश्लेषण विभिन्न रोगों (ऑटोइम्यून रोग, इम्युनोडेफिशिएंसी रोग, ट्यूमर निदान, हेमोस्टेसिस, एलर्जी रोग, और कई अन्य) और रोग विकृति का निदान करने के लिए सेल से संबंधित अनुसंधान क्षेत्रों में किया जाने वाला एक विशिष्ट प्रयोग है।इसका उपयोग विभिन्न कोशिका रोगों के अनुसंधान में कोशिका की गुणवत्ता का परीक्षण करने के लिए भी किया जाता है।फ्लो साइटोमेट्री और फ्लोरोसेंस माइक्रोस्कोप इम्यूनो-फेनोटाइपिंग के लिए उपयोग किए जाने वाले सेल रोग अनुसंधान संस्थानों में नियमित विश्लेषण विधियां हैं।लेकिन ये विश्लेषण विधियां या तो केवल छवियां या डेटा श्रृंखला प्रदान कर सकती हैं, जो नियामक अधिकारियों की सख्त अनुमोदन आवश्यकताओं को पूरा नहीं कर सकती हैं।

 

एम डोमिनिकी एल, साइटोथेरेपी (2006) वॉल्यूम।8, नंबर 4, 315-317

 

 

AdMSCs के इम्यूनो-फेनोटाइप की पहचान

AdMSCs के इम्यूनोफेनोटाइप को काउंटस्टार FL द्वारा निर्धारित किया गया था, AdMSCs को क्रमशः अलग-अलग एंटीबॉडी (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105, और HLADR) के साथ जोड़ा गया था।ग्रीन चैनल को छवि PE प्रतिदीप्ति, साथ ही एक उज्ज्वल क्षेत्र में सेट करके एक सिग्नल-रंग अनुप्रयोग प्रक्रिया बनाई गई थी।पीई प्रतिदीप्ति संकेत के नमूने के लिए उज्ज्वल क्षेत्र चित्र संदर्भ विभाजन को मास्क के रूप में लागू किया गया था।CD105 के परिणाम दिखाए गए (चित्र 1)।

 

चित्र 1 AdMSCs के इम्यूनो-फेनोटाइप की पहचान।A. AdMSCs की ब्राइट फील्ड और फ़्लोरेसेंस इमेज;B. काउंटस्टार FL द्वारा AdMSCs का सीडी मार्कर डिटेक्शन

 

 

MSCs का गुणवत्ता नियंत्रण - प्रत्येक एकल कक्ष के लिए परिणामों की पुष्टि

 

 

चित्रा 2 ए: काउंटस्टार एफएल परिणाम एफसीएस एक्सप्रेस 5 प्लस में प्रदर्शित किए गए थे, सीडी 105 का सकारात्मक प्रतिशत गेटिंग, और अवलोकन तालिका एकल कक्ष।बी: दाईं ओर समायोजित गेटिंग, सिंगल सेल टेबल की छवियां उन कोशिकाओं को दिखाती हैं जिनमें सीडी 105 की उच्च अभिव्यक्ति होती है।सी: बाईं ओर समायोजित गेटिंग, एकल कक्ष तालिका की छवियां उन कोशिकाओं को दिखाती हैं जिनमें सीडी 105 की कम अभिव्यक्ति होती है।

 

 

परिवहन के दौरान फेनोटाइपिकल परिवर्तन

 

चित्रा 3. ए: एफसीएस एक्सप्रेस 5 प्लस सॉफ्टवेयर द्वारा विभिन्न नमूनों में सीडी 105 के सकारात्मक प्रतिशत का मात्रात्मक विश्लेषण।बी: उच्च गुणवत्ता वाली छवियां अतिरिक्त रूपात्मक जानकारी प्रदान करती हैं।सी: प्रत्येक एकल सेल के थंबनेल द्वारा मान्य परिणाम, एफसीएस सॉफ्टवेयर टूल्स ने कोशिकाओं को अलग-अलग में विभाजित किया

 

 

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