A análise de inmunofenotipado é un experimento típico realizado en campos de investigación relacionados coas células para diagnosticar diversas enfermidades (enfermidade autoinmune, enfermidade da inmunodeficiencia, diagnóstico de tumores, hemostase, enfermidades alérxicas e moitas máis) e patoloxía da enfermidade.Tamén se usa para probar a calidade celular en varias investigacións de enfermidades celulares.A citometría de fluxo e o microscopio de fluorescencia son os métodos de análise de rutina nos institutos de investigación de enfermidades celulares utilizados para a inmunofenotipificación.Pero estes métodos de análise só poden proporcionar imaxes ou series de datos, que poden non cumprir os estritos requisitos de aprobación das autoridades reguladoras.
M Dominici el, Citoterapia (2006) Vol.8, no 4, 315-317
Identificación do inmunofenotipo de AdMSC
O inmunofenotipo dos AdMSC determinouse mediante Countstar FL, os AdMSC incubáronse con anticorpos diferentes respectivamente (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105 e HLADR).Creouse un procedemento de aplicación de cor de sinal configurando a canle verde para a fluorescencia de imaxe PE, ademais dun campo brillante.A segmentación de referencia da imaxe de campo brillante aplicouse como máscara para mostrar o sinal de fluorescencia PE.Mostráronse os resultados de CD105 (Figura 1).
Figura 1 Identificación do inmunofenotipo de AdMSC.A. Imaxe de campo brillante e fluorescencia dos AdMSC;B. Detección de marcadores de CD de AdMSC por Countstar FL
Control de calidade dos MSC: validando os resultados para cada célula
Figura 2 A: os resultados de Countstar FL mostráronse en FCS express 5plus, determinando a porcentaxe positiva de CD105 e as celas individuais da táboa xeral.B: Gateing axustado ao lado dereito, as imaxes da táboa de células únicas mostran aquelas células con alta expresión de CD105.C: a porta axustada ao lado esquerdo, as imaxes da táboa de células únicas mostran aquelas células con baixa expresión de CD105.
Cambios fenotípicos durante o transporte
Figura 3. A: Análise cuantitativa da porcentaxe positiva de CD105 en diferentes mostras mediante o software FCS express 5 plus.B: As imaxes de alta calidade proporcionan información morfolóxica adicional.C: Resultados validados mediante miniaturas de cada cela, as ferramentas de software FCS dividiron as celas en diferentes
