A análise de imunofenotipagem é um experimento típico realizado em campos de pesquisa relacionados a células para diagnosticar várias doenças (doença autoimune, doença de imunodeficiência, diagnóstico de tumor, hemostasia, doenças alérgicas e muito mais) e patologia da doença.Também é usado para testar a qualidade das células em várias pesquisas de doenças celulares.Citometria de fluxo e microscópio de fluorescência são os métodos de análise de rotina em institutos de pesquisa de doenças celulares usados para a imunofenotipagem.Mas esses métodos de análise podem fornecer apenas imagens ou séries de dados, que podem não atender aos rigorosos requisitos de aprovação das autoridades reguladoras.
M Dominici el, Citoterapia (2006) Vol.8, nº 4, 315-317
Identificação de Imunofenótipo de AdMSCs
O imunofenótipo de AdMSCs foi determinado por Countstar FL, AdMSCs foram incubadas com anticorpos diferentes, respectivamente (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105 e HLADR).Um procedimento de aplicação de cor de sinal foi criado definindo o canal verde para a fluorescência de PE da imagem, além de um campo claro.A segmentação de referência de imagem de campo claro foi aplicada como uma máscara para amostrar o sinal de fluorescência de PE.Os resultados de CD105 foram mostrados (Figura 1).
Figura 1 Identificação do Imunofenótipo de AdMSCs.A. Imagem de Campo Brilhante e Fluorescência de AdMSCs;B. Detecção de Marcador de CD de AdMSCs por Countstar FL
Controle de qualidade de MSCs - validando resultados para cada célula
Figura 2 A: Os resultados do Countstar FL foram exibidos no FCS express 5plus, controlando a porcentagem positiva de CD105 e as células individuais da tabela de visão geral.B: Gating ajustado para o lado direito, as imagens da tabela de célula única mostram aquelas células com alta expressão de CD105.C: Gating ajustado para o lado esquerdo, as imagens da tabela de células únicas mostram aquelas células com baixa expressão de CD105.
Alterações fenotípicas durante o transporte
Figura 3. A: Análise quantitativa da porcentagem positiva de CD105 em diferentes amostras pelo software FCS express 5 plus.B: Imagens de alta qualidade fornecem informações morfológicas adicionais.C: Resultados validados por miniaturas de cada célula, as ferramentas do software FCS dividiram as células em diferentes
