Analisis immuno-phenotyping adalah eksperimen khas yang dilakukan di bidang penelitian terkait sel untuk mendiagnosis berbagai penyakit (penyakit autoimun, penyakit imunodefisiensi, diagnosis tumor, hemostasis, penyakit alergi, dan banyak lagi) dan patologi penyakit.Ini juga digunakan untuk menguji kualitas sel dalam berbagai penelitian penyakit sel.Flow cytometry dan mikroskop fluoresensi adalah metode analisis rutin di lembaga penelitian penyakit sel yang digunakan untuk imunofenotipe.Tetapi metode analisis ini dapat memberikan gambar atau seri data saja, yang mungkin tidak memenuhi persyaratan persetujuan ketat dari otoritas pengatur.
M Dominici el, Sitoterapi (2006) Vol.8, No. 4, 315-317
Identifikasi Imuno-fenotipe AdMSCs
Imunofenotipe AdMSCs ditentukan oleh Countstar FL, AdMSCs masing-masing diinkubasi dengan antibodi yang berbeda (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105, dan HLADR).Prosedur aplikasi warna sinyal dibuat dengan menyetel saluran Hijau ke gambar fluoresensi PE, ditambah bidang terang.Segmentasi referensi gambar bidang terang diterapkan sebagai topeng untuk mengambil sampel sinyal fluoresensi PE.Hasil CD105 ditunjukkan (Gambar 1).
Gambar 1 Identifikasi Imuno-fenotipe AdMSCs.A. Bidang Terang dan Gambar Fluoresensi AdMSCs;B. Deteksi Penanda CD AdMSCs oleh Countstar FL
Kontrol kualitas MSC – memvalidasi hasil untuk setiap sel tunggal
Gambar 2 J: Hasil Countstar FL ditampilkan di FCS express 5plus, menampilkan persentase positif CD105, dan tabel ikhtisar sel tunggal.B: Gerbang yang disesuaikan ke sisi kanan, gambar tabel sel tunggal menunjukkan sel-sel dengan ekspresi CD105 yang tinggi.C: Gerbang yang disesuaikan ke sisi kiri, gambar tabel sel tunggal menunjukkan sel-sel dengan ekspresi CD105 yang rendah.
Perubahan Fenotipikal Selama Transportasi
Gambar 3. A: Analisis kuantitatif persentase positif CD105 dalam sampel yang berbeda oleh perangkat lunak FCS express 5 plus.B: Gambar berkualitas tinggi memberikan informasi morfologi tambahan.C: Hasil yang divalidasi dengan thumbnail dari setiap sel tunggal, perangkat lunak FCS membagi sel menjadi berbeda
