Analiza imuno-fenotipizacije tipičan je eksperiment koji se izvodi u istraživanjima vezanim za ćelije za dijagnosticiranje različitih bolesti (autoimuna bolest, bolest imunodeficijencije, dijagnoza tumora, hemostaza, alergijske bolesti i mnoge druge) i patologije bolesti.Također se koristi za testiranje kvalitete stanica u različitim istraživanjima staničnih bolesti.Protočna citometrija i fluorescentni mikroskop su rutinske metode analize u institutima za istraživanje bolesti ćelija koje se koriste za imuno-fenotipizaciju.Ali ove metode analize mogu da obezbede samo slike ili nizove podataka, koji možda ne ispunjavaju stroge zahteve za odobrenje regulatornih tela.
M Dominici el, Citoterapija (2006) Vol.8, br. 4, 315-317
Identifikacija imuno-fenotipa AdMSC-a
Imunofenotip AdMSC je određen pomoću Countstar FL, AdMSC su inkubirani sa različitim antitijelima (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105 i HLADR).Procedura primjene boje signala je kreirana postavljanjem zelenog kanala na sliku PE fluorescencije, plus svijetlo polje.Referentna segmentacija slike svijetlog polja primijenjena je kao maska za uzorkovanje PE fluorescentnog signala.Prikazani su rezultati CD105 (slika 1).
Slika 1. Identifikacija imuno-fenotipa AdMSC-a.A. Svetlo polje i fluorescentna slika AdMSC-a;B. Detekcija CD markera AdMSC-a od strane Countstar FL
Kontrola kvaliteta MSC-a – validacija rezultata za svaku pojedinačnu ćeliju
Slika 2 A: Countstar FL rezultati su prikazani u FCS express 5plus, gejting pozitivnog procenta CD105, i pregledna tabela pojedinačnih ćelija.B: Prilagođeno gajting na desnoj strani, slike tabele sa pojedinačnim ćelijama pokazuju one ćelije sa visokom ekspresijom CD105.C: Prilagođeno gajting na levoj strani, slike pojedinačnih ćelija u tabeli pokazuju one ćelije sa niskom ekspresijom CD105.
Fenotipske promjene tokom transporta
Slika 3. A: Kvantitativna analiza pozitivnog procenta CD105 u različitim uzorcima pomoću softvera FCS express 5 plus.B: Visokokvalitetne slike pružaju dodatne morfološke informacije.C: Validirani rezultati pomoću sličica svake pojedinačne ćelije, FCS softverski alati su podijelili ćelije u različite
