Analiza immunofenotypowania jest typowym eksperymentem przeprowadzanym w dziedzinach badań związanych z komórkami w celu diagnozowania różnych chorób (choroba autoimmunologiczna, choroba niedoboru odporności, diagnoza guza, hemostaza, choroby alergiczne i wiele innych) oraz patologia chorób.Służy również do testowania jakości komórek w badaniach nad różnymi chorobami komórkowymi.Cytometria przepływowa i mikroskop fluorescencyjny to rutynowe metody analizy w instytutach badań nad chorobami komórkowymi stosowane do immunofenotypowania.Ale te metody analizy mogą dostarczać tylko obrazy lub serie danych, które mogą nie spełniać surowych wymagań dotyczących zatwierdzenia przez organy regulacyjne.
M Dominici el, Cytoterapia (2006) tom.8, nr 4, 315-317
Identyfikacja immunofenotypu AdMSC
Immunofenotyp AdMSCs określono za pomocą Countstar FL, AdMSCs inkubowano odpowiednio z różnymi przeciwciałami (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105 i HLADR).Opracowano procedurę aplikacji koloru sygnału poprzez ustawienie kanału zielonego na obraz fluorescencji PE oraz jasnego pola.Segmentację referencyjną obrazu jasnego pola zastosowano jako maskę do próbkowania sygnału fluorescencji PE.Przedstawiono wyniki CD105 (ryc. 1).
Rysunek 1 Identyfikacja immunofenotypu AdMSC.A. Obraz jasnego pola i fluorescencyjny AdMSC;B. Wykrywanie znaczników CD w AdMSC przez Countstar FL
Kontrola jakości MSC – weryfikacja wyników dla każdej pojedynczej komórki
Rycina 2 A: Wyniki Countstar FL zostały wyświetlone w FCS express 5plus, bramkując dodatni procent CD105 i pojedyncze komórki w tabeli przeglądowej.B: Bramkowanie skorygowane do prawej strony, obrazy tabeli pojedynczych komórek pokazują komórki z wysoką ekspresją CD105.C: Bramkowanie skorygowane do lewej strony, obrazy tabeli pojedynczych komórek pokazują te komórki z niską ekspresją CD105.
Fenotypowe zmiany podczas transportu
Rycina 3. A: Analiza ilościowa dodatniego odsetka CD105 w różnych próbkach za pomocą oprogramowania FCS express 5 plus.B: Obrazy wysokiej jakości dostarczają dodatkowych informacji morfologicznych.C: Potwierdzone wyniki za pomocą miniatur każdej pojedynczej komórki, narzędzia programowe FCS podzieliły komórki na różne
