Anvendelse af et billedcytometer for at forbedre cellelinjeudvikling til biologiske stoffer og rAAV-produktion

Biologiske og AAV-baserede genterapier vinder flere markedsandele for sygdomsbehandling.At udvikle en robust og effektiv pattedyrcellelinje til deres produktion er imidlertid udfordrende og kræver normalt omfattende cellulær karakterisering.Historisk set er et flowcytometer brugt i disse cellebaserede assays.Et flowcytometer er dog relativt dyrt og indebærer omfattende træning til både drift og vedligeholdelse.For nylig, med en stigning i computeregenskaber og kamerasensorer af høj kvalitet, er billedbaseret cytometri blevet fornyet for at give et præcist og omkostningseffektivt alternativ til cellelinjeprocesudvikling.I dette arbejde beskrev vi en arbejdsgang for cellelinjeudvikling, der inkorporerer et billedbaseret cytometer, nemlig Countstar Rigel, til vurdering af transfektionseffektivitet og stabil pool-evaluering ved hjælp af CHO- og HEK293-celler, der udtrykker henholdsvis antistof og rAAV-vektor.I de to casestudier viste vi:

1. Countstar Rigel leverede samme detektionsnøjagtighed som flowcytometri.
2. Countstar Rigel-baseret poolevaluering kan hjælpe med at bestemme den ønskede gruppe til enkeltcellekloning (SCC).
3. Countstar Rigel inkorporerede cellelinjeudviklingsplatform opnåede 2,5 g/L mAb-titer.

Vi diskuterede også muligheden for at bruge Countstar som endnu et lag af et rAAV DoE-baseret optimeringsmål.

for flere detaljer, download venligst PDF-filen.