Клеточная терапия, несомненно, является новой надеждой на будущее биомедицины, но применение человеческих клеток в медицине не является новой концепцией.За последние несколько десятилетий клеточная терапия достигла больших успехов, и сама клеточная терапия уже не является простым сбором клеток и вливанием обратно.В настоящее время часто требуется биоинженерия клеток, например, терапия CAR-T-клетками.Мы стремимся предоставить вам стандартизированное оборудование уровня GMP для контроля качества клеток.Продукт был принят многими компаниями, ведущими клеточную терапию, мы можем помочь нашим клиентам создать стабильную, надежную систему мониторинга концентрации клеток и жизнеспособности.
Проблемы с количеством клеток и жизнеспособностью
На всех этапах клинического производства CAR-T-клеток необходимо точно определить их жизнеспособность и количество клеток.
Свежевыделенные первичные клетки или культивированные клетки могут содержать примеси, несколько типов клеток или мешающие частицы, такие как клеточный дебрис, что сделает невозможным анализ интересующих клеток.
Двойной флуоресцентный подсчет жизнеспособности с помощью Countstar Rigel S2
Акридиновый оранжевый (AO) и йодид пропидия (PI) являются красителями, связывающими ядерные нуклеиновые кислоты.АО может проникать как в мертвые, так и в живые клетки и окрашивать ядерные клетки, вызывая зеленую флуоресценцию.PI может окрашивать мертвые ядерные клетки с поврежденными мембранами и вызывать красную флуоресценцию.Анализ исключает клеточные фрагменты, дебрис и частицы артефактов, а также объекты меньшего размера, такие как тромбоциты, что дает очень точный результат.В заключение следует отметить, что систему S2 можно использовать на каждом этапе процесса производства ячеек.
A: Метод AO/PI может точно различать живое и мертвое состояние клеток, а также может исключать помехи.При тестировании разведенных образцов метод двойной флуоресценции показывает стабильные результаты.
Определение цитотоксичности, опосредованной T/NK-клетками
Помечая опухолевые клетки-мишени нетоксичным, нерадиоактивным кальцеином AM или трансфицируя GFP, мы можем контролировать уничтожение опухолевых клеток CAR-T-клетками.В то время как живые раковые клетки-мишени будут помечены зеленым кальцеином AM или GFP, мертвые клетки не могут удерживать зеленый краситель.Hoechst 33342 используется для окрашивания всех клеток (как Т-клеток, так и опухолевых клеток), альтернативно, опухолевые клетки-мишени могут быть окрашены мембраносвязанным кальцеином AM, а PI используется для окрашивания мертвых клеток (как Т-клеток, так и опухолевых клеток).Эта стратегия окрашивания позволяет различать разные клетки.
Согласованный подсчет клеток и глобальное управление данными
Общей проблемой при обычном подсчете ячеек являются различия в данных между пользователями, отделами и площадками.Все анализаторы одинаково в разных местах или на разных производственных площадках.Это связано с тем, что в процессе контроля качества каждый прибор должен быть откалиброван по эталонному прибору.
Центральный банк данных позволяет пользователю хранить все данные, такие как отчет об испытаниях прибора, отчет об образцах клеток и электронную подпись тестера, в безопасности и на постоянной основе.
Car T Cell Therapy: новая надежда на лечение рака
Терапия CAR-T-клетками, несомненно, является новой надеждой на будущее биомедицины для лечения рака.На всех этапах клинического производства CAR-T-клеток необходимо точно определить их жизнеспособность и количество клеток.
Countstar Rigel был принят многими компаниями, ведущими CAR-T-клеточную терапию, мы можем помочь нашим клиентам создать стабильную, надежную систему мониторинга концентрации клеток и жизнеспособности.
